Anti-CD28 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, FC, ELISA - P10747

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD28-Funktion und -Lokalisierung

• Proteinidentität: CD28, auch bekannt als Tp44, ist ein T-Zell-spezifisches Oberflächen-Glykoprotein und Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie, kodiert durch das CD28-Gen.
• Kostimulatorische Rezeptorfunktion: CD28 ist essentiell für T-Zell-Aktivierung, -Proliferation, -Überleben und Immunhomöostase (PubMed:1650475, PubMed:7568038). Verwandte Referenzen: PMID:1650475, PMID:7568038
• Einzigartige Signaltransduktion: Über die Verstärkung von TCR-Signalen hinaus liefert CD28 einzigartige Signale, die die Genexpressionslandschaft von T-Zellen umprogrammieren (PubMed:24665965). Verwandte Referenzen: PMID:24665965
• Ligandeninduzierte Zytokinproduktion: Bindung durch CD80 oder CD86 treibt robuste IL-2-Expression und Proliferation in sowohl CD4+ als auch CD8+ T-Zell-Subsets an (PubMed:12196291, PubMed:1650475, PubMed:35397202). Verwandte Referenzen: PMID:12196291, PMID:1650475, PMID:35397202
• NF-κB-Aktivierungsmechanismus: Ligandenbindung rekrutiert PRKCQ und GRB2, was NF-κB-Aktivierung über PI3K/Akt-abhängige und -unabhängige Wege auslöst (PubMed:21964608, PubMed:24665965, PubMed:7568038). Verwandte Referenzen: PMID:21964608, PMID:24665965, PMID:7568038
• Synergie mit CD40L: In Kombination mit TCR/CD3-Ligation und CD40L-Kostimulation verstärkt CD28 die IL-4- und IL-10-Produktion (PubMed:8617933). Verwandte Referenzen: PMID:8617933
• Subzelluläre Lokalisierung und Gewebespezifität: Konstitutiv exprimiert auf der Zelloberfläche und Membran von T-Zellen und Plasmazellen; fehlt in unreifen B-Zellen.
• Posttranslationale Modifikationen: Ein glykosyliertes und phosphoryliertes Protein mit einer Single-Pass-Transmembrandomäne, einer extrazellulären Ig-ähnlichen Domäne und Disulfidbrücken; unterliegt alternativem Spleißen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem humanen CD28 (P10747) in voller Länge, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich native, konformationsabhängige Epitope erkennt. Für denaturierende Anwendungen wie Western Blot sollten reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, um das ~25 kDa Band vollständig aufzulösen.
• Angesichts der Zelloberflächenexpression kann Durchflusszytometrie an lebenden, unfixierten T-Zellen eine optimale Färbung ergeben; ein Vitalfarbstoff-Ausschluss ist ratsam.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte gewährleistet Eignung für translationale Modelle, aber eine Validierung in der relevanten Spezies und im relevanten Proben-System wird dringend empfohlen.
• Für ELISA kann rekombinantes CD28 oder Zelllysat-Beschichtung verwendet werden; eine Schachbrett-Titration zur Bestimmung optimaler Mengen wird empfohlen.

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