Anti-CD275 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB - O75144

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des ICOS-Liganden

• Der ICOS-Ligand (ICOSL), auch bekannt als B7-Homolog 2 (B7-H2), B7-ähnliches Protein Gl50 und B7-verwandtes Protein 1 (B7RP-1), ist ein Mitglied der B7-Familie von immunologischen Kostimulationsmolekülen.
• Er fungiert als Ligand für den T-Zell-spezifischen Rezeptor ICOS und vermittelt ein kostimulatorisches Signal für die T-Zell-Proliferation und Zytokinsekretion (PubMed:11007762, PubMed:11023515). Verwandte Referenzen: PMID:11007762 PMID:11023515
• ICOSL induziert auch die Proliferation von B-Zellen und deren Differenzierung zu Plasmazellen, was seine Rolle in der humoralen Immunität unterstreicht.
• In Endothelzellen ist ICOSL für eine ordnungsgemäße Neutrophilen-Transmigration als Reaktion auf Chemokine wie CXCL8/IL-8 oder N-Formyl-Methionyl-Peptide (fMLP) erforderlich (PubMed:30498080). Verwandte Referenzen: PMID:30498080
• Das Protein ist in der Zellmembran lokalisiert, was seiner Funktion als transmembraner Ligand entspricht.
• ICOSL wird auf peripheren B-Zellen des Blutes, Monozyten und monozyten-abgeleiteten dendritischen Zellen exprimiert; es ist zudem weitgehend in Geweben einschließlich Gehirn, Herz, Niere, Leber, Lunge und lymphatischen Organen verbreitet.
• Strukturell enthält es eine Immunglobulin-Domäne, eine Disulfidbrücke, ein Signalpeptid, eine transmembrane Helix und unterliegt einer N-verknüpften Glykosylierung.
• Alternatives Spleißen führt zu mehreren Transkriptvarianten, die potenziell dessen Expression und Funktion modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Region (Aminosäuren 19-256) von menschlichem ICOSL (NP_056074.1) und deckt die immunglobulinähnliche Domäne ab. Dieses Design begünstigt die Erkennung des nativen Proteins im Western Blot.
• Für den WB wird eine Bande um 33 kDa erwartet, obwohl posttranslationale Modifikationen wie Glykosylierung das scheinbare Molekulargewicht verschieben können. Ziehen Sie Entglykosylierungs-Assays in Betracht, um die Spezifität zu bestätigen.
• Da der Antikörper mit murinem ICOSL kreuzreagiert, eignet er sich für vergleichende Studien zwischen menschlichen und murinen Proben. Validieren Sie die Leistung im entsprechenden Gewebe oder der entsprechenden Zelllinie (z. B. aktivierte B-Zellen, Monozyten).
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz überprüft werden; die Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen wird empfohlen.
• Für optimale Ergebnisse bestimmen Sie die ideale Verdünnung empirisch, beginnend mit einem Bereich (z. B. 1:500–1:2000) basierend auf den Empfehlungen des Lieferanten und Ihren experimentellen Bedingungen.

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