Anti-CD27 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – P26842

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD27

• Das CD27-Antigen (Aliasnamen: T14, TNFRSF7, Tp55) ist ein Mitglied der Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilie und fungiert als kostimulatorischer Immun-Checkpoint-Rezeptor auf der Oberfläche von T-Zellen, NK-Zellen und B-Zellen.
• Sein primärer Ligand ist CD70 (CD27L), und der CD70-CD27-Signalweg treibt die antigenspezifische Aktivierung und Expansion von T-Zellen voran und ermöglicht die Immunüberwachung von B-Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:28011863
• Mechanistisch aktiviert die Bindung von CD70 die TRAF2-PTPN6-Achse und hemmt die Phosphorylierung von LCK, wodurch Anpassungen des T-Zell-Gedächtnisses gefördert werden. Verwandte Referenzen: PMID:38354704
• Darüber hinaus vermittelt die Bindung von CD27 an frühe Vorläuferzellen ein negatives Rückkopplungssignal an die Leukozytendifferenzierung, moduliert die Hämatopoese und reguliert die Funktion von Th2-Lymphozyten im Fettgewebe negativ.
• Das Protein ist ein Transmembranrezeptor mit einmaliger Membrandurchquerung, der ausschließlich an der Zellmembran lokalisiert ist und ein Signalpeptid, extrazelluläre TNFR-ähnliche, cysteinreiche Domänen, eine Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz enthält.
• Zu den wichtigsten posttranslationalen Modifikationen zählen die N-Glykosylierung und Phosphorylierung; der Rezeptor ist außerdem durch Disulfidbrücken gekennzeichnet, die seine extrazelluläre Struktur stabilisieren.
• CD27 wird auf den meisten T-Lymphozyten breit exprimiert, und seine Signalübertragung ist an Apoptose, krankheitsassoziierten Varianten lymphoproliferativer Syndrome und der hämatopoetischen Regulation beteiligt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 20–191) des humanen CD27, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich Epitope innerhalb der Ligandenbindungsregion erkennt; bei Bedarf sollte ein Epitop-Mapping durchgeführt werden, wenn genaue Informationen zur Bindungsstelle erforderlich sind.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 29 kDa; aufgrund der Glykosylierung kann die beobachtete Bande jedoch bei einem höheren scheinbaren Molekulargewicht wandern. Validieren Sie den Antikörper, soweit angemessen, unter reduzierenden und nicht reduzierenden Bedingungen.
• Für den Antikörper wird eine Kreuzreaktivität mit murinem CD27 berichtet, wodurch er sich potenziell für vergleichende Studien eignet; überprüfen Sie die Kreuzreaktivität stets im jeweiligen experimentellen System.
• ELISA-Anwendungen können davon profitieren, diesen polyklonalen Antikörper in einem Sandwich-Format mit einem monoklonalen Detektionsantikörper zu kombinieren; optimieren Sie die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen empirisch.
• Da es sich um eine polyklonale Präparation handelt, sollte die Chargenkonsistenz in quantitativen Assays überwacht werden; wenn eine besonders hohe Reproduzierbarkeit erforderlich ist, sollte die Verwendung eines rekombinanten monoklonalen Antikörpers in Betracht gezogen werden.

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