Anti-CD27 Monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P26842

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD27

• CD27 ist ein kostimulatorischer Immun-Checkpoint-Rezeptor aus der Superfamilie der Tumornekrosefaktorrezeptoren (TNFRSF7), der auf der Oberfläche von T-Zellen, NK-Zellen und B-Zellen exprimiert wird. Verwandte Referenzen: PMID:28011863
• Nach Bindung an seinen Liganden CD70 aktiviert CD27 die TRAF2-PTPN6-Signalachse, die die LCK-Phosphorylierung hemmt und die Bildung von T-Zell-Gedächtnis sowie transkriptionelle Anpassung fördert. Verwandte Referenzen: PMID:38354704
• Der CD70-CD27-Signalweg ist für die antigenspezifische T-Zell-Aktivierung und -Expansion unerlässlich, wodurch die Immunüberwachung von B-Zellen gewährleistet wird. Verwandte Referenzen: PMID:28011863
• CD27 liefert negative Rückkopplungssignale während der Leukozyten differenzierung und moduliert die Hämatopoese bei Immunaktivierung.
• Im Fettgewebe reguliert CD27 die Funktion von Th2-Lymphozyten negativ und beeinflusst möglicherweise die metabolische Entzündung.
• Subzellulär lokalisiert sich CD27 als Transmembranprotein des einfachen Durchgangs Typs I auf der Zellmembran.
• Das Protein erfährt posttranslationelle Modifikationen, einschließlich N-Glykosylierung und Phosphorylierung, und enthält drei intramolekulare Disulfidbindungen, die seine extrazelluläre Domäne stabilisieren.
• UniProt annotiert CD27 mit Schlüsselwörtern wie Rezeptor, Signalpeptid, Transmembranhelix, Disulfidbindung, Glykoprotein, Phosphoprotein, Apoptose und Krankheitsvariante; es kommt überwiegend in den meisten T-Lymphozyten vor.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1–100 von menschlichem CD27 abdeckt und auf die N-terminale extrazelluläre Domäne abzielt, die auf der Zelloberfläche exponiert ist und an der Ligandenbindung beteiligt ist. Dieses Design erzeugt wahrscheinlich Antikörper, die natives, oberflächenexprimiertes CD27 erkennen.
• Für das Western Blotting beträgt das voraussichtliche Molekulargewicht von CD27 ungefähr 29 kDa; aufgrund der Glykosylierung kann es jedoch als diffuse Bande zwischen 30–55 kDa wandern. Validieren Sie mit einem Positivkontrolllysat, wie z. B. Jurkat oder anderen T-Zelllinien.
• Dieser Antikörper wurde für WB, IF-P und ELISA mit menschlichen und Rattenspezies getestet. Für die Immunfluoreszenz (IF-P) ist eine Permeabilisierung erforderlich, um intrazelluläre Epitope nachzuweisen oder Oberflächenfärbung zu überprüfen. Fügen Sie immer geeignete Negativkontrollen hinzu.
• CD27 kann nach Aktivierung von der Zelloberfläche abgespalten werden, wodurch lösliches CD27 (sCD27) entsteht. Wenn Sie sCD27 per ELISA oder anderen Methoden nachweisen, erwägen Sie die Verwendung von Zellkulturüberständen oder Serumproben.
• Um eine optimale Leistung zu gewährleisten, lagern Sie den Antikörper bei -20 °C in Arbeitsaliquoten, um wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen zu vermeiden. Der Versand mit Eisbeuteln bedeutet, dass der Antikörper unter kalten Transportbedingungen stabil ist.

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