Anti-CD24 Kaninchenmonoklonaler Antikörper für WB, IF, FC, ELISA – P24807

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD24

• CD24, auch bekannt als hitzestabiles Antigen (HSA), Nektadrin und Lymphozytenantigen 52 (Ly-52), ist ein Signaltransduktorprotein, das auf lymphoiden, myeloiden und erythroiden Zellen exprimiert wird.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Zelldifferenzierung, insbesondere bei der Entwicklung früher Thymozyten, und moduliert die B-Zell-Aktivierungsantworten.
• In Verbindung mit SIGLEC10 unterdrückt CD24 selektiv Immunantworten gegen gefahrenassozierte molekulare Muster (DAMPs) wie HMGB1, HSP70 und HSP90. Zugehörige Referenzen: PMID:19264983
• CD24 ist an der Kontrolle von Autoimmunität beteiligt. Zugehörige Referenzen: PMID:20200274
• Das Protein ist über einen GPI-Anker an die Zellmembran gebunden und besitzt ein Signalpeptid; das reife Polypeptid hat ein Molekulargewicht von etwa 8 kDa (7,8 kDa berechnet aus der Sequenz).
• CD24 ist ein Glykoprotein, das an der angeborenen Immunität beteiligt ist, und seine GPI-verankerte Struktur erleichtert die Signalübertragung durch Freisetzung von sekundären Botenstoffen.
• Es wird stark auf hämatopoetischen Zellen exprimiert, was mit seiner Rolle bei der Immunregulation übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für die Western Blotting hat CD24 ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~8 kDa; verwenden Sie hochprozentige Gele (z. B. 15 % SDS-PAGE) und Molekulargewichtsmarker im niedrigen Bereich für eine genaue Detektion.
• Bei Immunfluoreszenzanwendungen (IF/ICC, IF-P) lokalisiert sich CD24 an der Zellmembran; die Verdünnung des Primärantikörpers und die Permeabilisierungsbedingungen sollten für den Probentyp optimiert werden.
• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie einen Anti-Kaninchen-IgG-Sekundärantikörper und sorgen Sie für eine korrekte Zelloberflächenfärbung mit lebenden, unfixierten Zellen, um die GPI-verankerten Epitope zu erhalten.
• Für die ELISA entspricht die Immunogensequenz (Aminosäuren 27–53) der N-terminalen extrazellulären Domäne von reifem CD24; erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem CD24 als Positivkontrolle.
• Da dieser Antikörper ein kaninchenmonoklonaler Antikörper ist, der gegen Maus-CD24 gerichtet ist, verwenden Sie speciesangepasste Sekundärantikörper, um Kreuzreaktivität mit endogenen Maus-Immunglobulinen in Mausgewebe- oder Zellproben zu vermeiden.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität mit geeigneten Kontrollen wie CD24-Knockout-Zelllinien oder Blockierungspeptiden, insbesondere bei der Interpretation von Ergebnissen aus komplexen Gewebelysaten.

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