Anti-CD20 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB und IHC-P - P11836

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD20

• B-lymphozytenspezifisches Membranprotein, das eine Rolle bei der Regulation des zellulären Kalziumeinstroms spielt, der für die Entwicklung, Differenzierung und Aktivierung von B-Lymphozyten erforderlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:12920111, PMID:3925015, PMID:7684739
• Wirkt als Komponente eines speicherbetriebenen Kalziumkanals (SOC), der den Kalziumeinstrom nach Aktivierung durch den B-Zellrezeptor/BCR fördert. Verwandte Referenzen: PMID:12920111, PMID:18474602, PMID:7684739
• Lokalisiert auf der Zellmembran, die Expression ist spezifisch für B-Zellen.
• Enthält wichtige posttranslationale Modifikationen einschließlich Palmitoylierung, Phosphorylierung und einer Disulfidbindung; es wird zudem als Lipoprotein klassifiziert.
• Ein gut etabliertes pharmazeutisches Ziel für Therapien zur B-Zelldepletion, was durch seine Aufnahme in das pharmazeutische Schlüsselwort von UniProt unterstrichen wird.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen des Proteins.
• Die kanonische Isoform hat ein Molekulargewicht von etwa 33 kDa (UniProt-annotierte Masse: 33.077 Da).

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen für diesen Antikörper ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 100–200 von humanem CD20 entspricht – eine Region, die extrazelluläre Epitope enthalten kann, die für die Erkennung des nativen Oberflächenantigens geeignet sind.
• Für den Western Blot (WB) ist eine Bande nahe 33 kDa in B-Zelllysaten zu erwarten; verwenden Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. Raji- oder Daudi-Zelllinien) und validieren Sie mit siRNA- oder Knockout-Modellen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) wird erwartet, dass die CD20-Färbung in B-Zellzonen lymphatischer Gewebe (z. B. Mandel, Lymphknoten) membranlokalisiert ist; optimieren Sie die Antigenretrieval und Antikörpertitration für formalinfixierte paraffineingebettete Schnitte.
• Für Durchflusszytometrie (FC) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) testen Sie auf B-Zelllinien oder primären PBMCs; bestätigen Sie die Spezifität mit Isotypkontrollen und überprüfen Sie wie angegeben die Kreuzreaktivität mit Krabbenmakaken.
• ELISA-Anwendungen können die Paarung mit einem geeigneten Detektionsantikörper erfordern; erwägen Sie die Durchführung von Schachbretttiterungen und berücksichtigen Sie potenzielle Matrixeffekte durch Serum- oder Plasmaproben.

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