Anti-CD18 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P05107

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD18-Funktion und Lokalisierung

• CD18 (Integrin beta-2, ITGB2) ist ein Typ I Transmembranglykoprotein, das sich mit mehreren α-Untereinheiten (CD11a, CD11b, CD11c, CD11d) zu heterodimeren Integrinen paart: LFA-1 (αLβ2), Mac-1 (αMβ2), p150,95 (αXβ2) und αDβ2 (αDβ2).
• Diese Integrine vermitteln Leukozytenadhäsion und -transmigration durch Bindung an ICAMs (1-3), VCAM1, Komplement iC3b, Fibrinogen und Faktor X, was entscheidend für den Transport und die Effektorfunktionen von Immunzellen ist (PubMed:1676048, PubMed:23775590, PubMed:38195629, PubMed:29100055, PubMed:10438935, PubMed:8777714, PubMed:9841932, PubMed:11812992, PubMed:28807980, PubMed:18587400). Verwandte Referenzen: PMID:1676048, PMID:23775590, PMID:38195629, PMID:29100055, PMID:10438935, PMID:8777714, PMID:9841932, PMID:11812992, PMID:28807980, PMID:18587400
• Als Schlüsselrezeptor für die Clearance apoptotischer Zellen kooperiert LFA-1 (αLβ2) mit ICAM3, um die Phagozytose apoptotischer Neutrophiler durch Makrophagen zu fördern (PubMed:23775590). Zusätzlich erkennt αXβ2 erythrozytäres ICAM4 und neuronales ICAM5, was Integrine mit Erythrophagozytose und Neuron-Leukozyten-Interaktionen verbindet (PubMed:16985175, PubMed:10741396). Verwandte Referenzen: PMID:23775590, PMID:16985175, PMID:10741396
• CD18-Integrine tragen zur Zytotoxizität natürlicher Killerzellen bei (PubMed:15356110). Mac-1 (αMβ2) wird für die CD177‑PRTN3-vermittelte Aktivierung von TNF‑primierten Neutrophilen benötigt (PubMed:21193407). Verwandte Referenzen: PMID:15356110, PMID:21193407
• Subzellulär lokalisiert CD18 an der Zellmembran und in Membranrafts von Leukozyten, insbesondere Neutrophilen (PubMed:23775590, PubMed:21193407, PubMed:28807980). Verwandte Referenzen: PMID:23775590, PMID:21193407, PMID:28807980
• Das Protein ist stark glykosyliert, enthält EGF‑ähnliche Domänen und beherbergt Kalzium-/Magnesium-Bindungsmotive, die für die Integrinaktivierung essentiell sind. Es wird post‑translational durch Phosphorylierung modifiziert und weist an seinem N‑Terminus eine Pyrrolidoncarbonsäure auf.
• Konsistent mit seiner essentiellen Rolle bei der Leukozytenadhäsion sind ITGB2-Mutationen mit Immundefekten wie Leukozytenadhäsionsdefizienz (LAD) Typ I assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem N‑Terminus (aa 1–100) von humanem CD18; überprüfen Sie die Reaktivität in der beabsichtigten Spezies/Anwendung mittels Positivkontrolllysaten (z.B. humane, murine oder ratten Leukozyten).
• Für Western Blot (WB) ist ein vorherrschendes Band bei ~85 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Verwendung reduzierender Bedingungen und das Sonden mit geeigneten Sekundärantikörpern.
• Für Paraffin-Immunfluoreszenz (IF‑P) und Immunhistochemie (IHC‑P) optimieren Sie die Antigen-Demaskierung (hitzeinduzierte Epitop-Demaskierung ist üblicherweise erforderlich) und titrieren Sie den Primärantikörper, um den Hintergrund zu reduzieren.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise das Beschichten mit dem rekombinanten Immunogen oder nativen Integrinkomplexen; kombinieren Sie mit einem detektierenden Sekundärantikörper, um eine Standardkurve zu erstellen.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte validieren Sie die Antikörperspezifität in den relevanten Modellsystemen, wenn Sie zwischen Spezies wechseln.

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