Anti-CD177-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für FC, ELISA – Q8N6Q3

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD177

• CD177, auch als humanes Neutrophilen-Alloantigen 2a (HNA-2a), NB1-Glykoprotein (NB1 GP) und Polycythaemia-rubra-vera-Protein 1 (PRV-1) bekannt, ist ein GPI-verankertes Glykoprotein, das hauptsächlich auf Neutrophilen exprimiert wird.
• Im Komplex mit Beta-2-Integrinen (ITGAM/CD11b und ITGB2/CD18) vermittelt CD177 die TNF-initiierte Aktivierung von Neutrophilen, einschließlich Degranulation und Superoxidproduktion. Zugehörige Referenzen: PMID:21193407
• CD177 moduliert den Neutrophilentransport, indem es die Internalisierung von Beta-2-Integrinen verhindert und die Chemokinsignalgebung abschwächt, wodurch die Adhäsion gegenüber der Migration begünstigt wird. Zugehörige Referenzen: PMID:28807980
• Durch die heterophile Interaktion mit PECAM1 auf Endothelzellen trägt CD177 in vitro zur transendothelialen Migration von Neutrophilen bei, obwohl In-vivo-Studien darauf hindeuten, dass es für die durch bakterielle Infektionen induzierte Rekrutierung entbehrlich ist. Zugehörige Referenzen: PMID:17580308 PMID:23461681
• CD177 dient als Membranrezeptor für die reife Protease PRTN3, ermöglicht deren Präsentation auf der Oberfläche von Neutrophilen und kann möglicherweise die Integrität endothelialer Verbindungen während der Diapedese verbessern. Zugehörige Referenzen: PMID:17244676 PMID:18462208 PMID:23202369
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert CD177 in der Zellmembran, in Membran-Rafts, den Membranen zytoplasmatischer Granula und in Lamellipodien; es kann auch in einer sezernierten Form vorliegen.
• Die Gewebeexpression ist hochspezifisch für die Neutrophilenlinie, beginnt im Metamyelozytenstadium und findet sich auf einer Subpopulation reifer Neutrophilen, deren prozentualer Anteil zwischen Individuen variiert; bei Patienten mit Polycythaemia vera und essenzieller Thrombozythämie ist CD177 in Granulozyten überexprimiert. Zugehörige Referenzen: PMID:10753836 PMID:17244676 PMID:18462208 PMID:24926686 PMID:12377969 PMID:12675722 PMID:17580308 PMID:21193407 PMID:27227454 PMID:28240246 PMID:28807980

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 22–407 des humanen CD177 (NP_065139.2) und deckt damit nahezu die gesamte extrazelluläre Domäne ab; daher ist der Antikörper wahrscheinlich für den Nachweis von nativem, auf der Zelloberfläche befindlichem CD177 mittels Durchflusszytometrie (FC) und ELISA geeignet.
• Für Anwendungen in der Durchflusszytometrie sollte eine mit Neutrophilen angereicherte Population oder Vollblutproben gesunder Spender verwendet werden. Dabei ist zu beachten, dass die CD177-Expression auf eine Untergruppe reifer Neutrophilen beschränkt ist und zwischen Individuen variieren kann.
• Für ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz eingesetzt werden; eine empirische Optimierung der Arbeitskonzentrationen und Pufferbedingungen wird empfohlen.
• Aufgrund seiner Rolle bei der TNF-initiierten Aktivierung von Neutrophilen kann der Antikörper zur Untersuchung der CD177-Expression und -Funktion in entzündlichen Kontexten eingesetzt werden; eine Validierung im relevanten Probensystem ist jedoch unerlässlich.
• Da das Protein in mehreren Isoformen vorliegt (vorhergesagte Molekulargewichte von etwa 46 kDa für die vollständige Form sowie mögliche Formen mit 27 kDa und 15 kDa), sollten die detektierten Bandenhöhen im jeweiligen Versuchsaufbau bestätigt werden.

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