Anti-CD16 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08637/O75015

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD16

• CD16a (FCGR3A) ist ein Rezeptor mit niedriger Affinität für das Fc-Fragment von IgG, der hauptsächlich auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) und einer Subpopulation von Monozyten exprimiert wird. Er spielt eine zentrale Rolle bei der antikörperabhängigen zellvermittelten Zytotoxizität (ADCC) und der Zytokinproduktion. Verwandte Referenzen: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369, PMID:27670158
• Nach der Bindung an IgG-opsonisierte Ziele löst CD16a ITAM-vermittelte Signalkaskaden aus, die zur Aktivierung von NK-Zellen, Degranulierung und Lyse der Zielzelle führen. Dieser Prozess ist entscheidend für die antivirale Immunität und die Tumorüberwachung. Verwandte Referenzen: PMID:24412922, PMID:25786175, PMID:29967280, PMID:9916693, PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• CD16a kann NK-Zellen auch kostimulieren und die Lyse von Zielzellen unabhängig von der IgG-Bindung vermitteln, was seine Rolle bei der angeborenen Immunaktivierung unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:10318937, PMID:23006327
• Der Rezeptor vermittelt die Antitumorwirkung therapeutischer monoklonaler Antikörper, wobei bei der Bindung an afukosylierte IgGs eine erhöhte Aktivität beobachtet wird. Verwandte Referenzen: PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• Im Kontext einer Dengue-Virus-Infektion erleichtert CD16a die antikörperabhängige Verstärkung (ADE) durch Bindung an afukosylierte IgG1-Virus-Komplexe und fördert so den viralen Eintritt in myeloide Zellen.
• Subzellulär ist CD16a über eine Transmembranhelix an der Zellmembran verankert und kann auch in sezemierter Form vorliegen. Er unterliegt Phosphorylierung und Glykosylierung, die seine Signalfunktionen modulieren.
• Die Gewebeexpression ist auf NK-Zellen und eine Subpopulation von Monozyten beschränkt, was auf Proteinebene bestätigt wurde. Verwandte Referenzen: PMID:2526846, PMID:27670158

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 20-208) von humanem CD16b ab, was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein Epitop erkennt, das zwischen CD16a und CD16b konserviert ist. Erwägen Sie eine direkte Validierung der Kreuzreaktivität in Ihrem Modellsystem.
• Für das Western Blotting ist eine Bande bei etwa 29 kDa (nicht glykosylierte Form) zu erwarten, aber aufgrund starker Glykosylierung können höhere Molekulargewichtsschmieren auftreten. Die Verwendung eines Reduktionsmittels und die Optimierung des Gelprozentsatzes können die Auflösung verbessern.
• Bei IHC-P ist ein Membranfärbemuster zu erwarten; schließen Sie geeignete negative und positive Kontrollen ein (z. B. NK-Zell-reiche Gewebe wie Milz oder Mandel).
• Für IF/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, um das extrazelluläre Epitop zu erhalten; eine Färbung von lebenden Zellen kann auch für oberflächenständiges CD16 geeignet sein.
• ELISA-Anwendungen können von der Paarung mit einem Detektionsantikörper profitieren, der auf ein anderes Epitop abzielt; berücksichtigen Sie die mögliche Interferenz durch die Bindung afukosylierter IgG in bestimmten Assayformaten.

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