Anti-CD16 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P08637 / O75015

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD16 (FcγRIIIA) Funktion und Lokalisierung

• CD16, codiert durch das FCGR3A-Gen (Rezeptor mit niedriger Affinität für die Fc-Region von Immunglobulin Gamma III-A), ist ein Transmembran-Glykoprotein, das auch als CD16a, FcγRIIIα, FcR-10 und IgG-Fc-Rezeptor III-2 bekannt ist.
• Als Schlüsselrezeptor für den Fc-Fragment von IgG erkennt CD16 gruppierte Antigen-IgG-ImmunKomplexe und löst die antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität (ADCC) in natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) und Monozyten aus. Diese Funktion ist entscheidend für die Beseitigung antikörperbeschichteter Zielzellen während der Infektion und der Tumorüberwachung. Verwandte Referenzen: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369
• Über die zytotoxische Aktivität hinaus fördert die CD16-Signalisierung die Entstehung von speicherähnlichen adaptiven NK-Zellen, die hohe Mengen an IFNG produzieren und eine verbesserte antivirale und antitumorale Kapazität aufweisen. Verwandte Referenzen: PMID:24412922, PMID:25786175
• Die CD16-Engagement führt zur Phosphorylierung von ITAM-haltigen Adaptoren und zur Aktivierung von downstream-Kinasen (z. B. PI3K) sowie zum intrazellulären Calciumfluss, der sowohl die Zytokinproduktion als auch die Degranulation steuert. Verwandteck Referenzen: PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• Der Rezeptor lokalisiert sich primär auf der Zellmembran von NK-Zellen und einer Teilmenge zirkulierender Monozyten; er kann auch in einer löslichen Form abgegeben werden.
• CD16 ist hochrelevant in der Krebsimmuntherapie, da es die antitumoralen Wirkungen von therapeutischen Antikörpern vermittelt und mit verbesserter Opsonisierung und ADCC auf afucosylierte IgG-Glykoformen reagiert. Verwandte Referenzen: PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• Im Kontext der Dengue-Virus-Infektion kann CD16 zur antikörperabhängigen Verstärkung (ADE) beitragen, bei der subneutralisierende IgG-Komplexe den Eintritt des Virus in myeloische Zellen erleichtern und die Pathogenese verschlimmern.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 20–208 von menschlichem CD16 umfasst) entspricht der extrazellulären Region; daher wird erwartet, dass der Antikörper natives, oberflächenexprimiertes CD16 erkennt. Forscher können in Betracht ziehen, Live-Cell-Färbung oder nicht-denaturierende Bedingungen zu verwenden, um die native Konformation zu bewahren.
• Für Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von CD16 ca. 29 kDa (P08637) oder 26 kDa (O75015), aber die reife glykosylierte Form wandert oft höher. Validieren Sie das beobachtete Bandmuster im relevanten Probenystem und fügen Sie bei Bedarf geeignete Entglykosylierungskontrollen hinzu.
• In ELISA kann dieser Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden. Aufgrund seiner Kreuzreaktivität mit Maus-CD16 kann er in xenogenen Modellsystemen eingesetzt werden, aber Benutzer sollten die Spezifität und Empfindlichkeit unter ihren eigenen experimentellen Bedingungen bestätigen.
• Da CD16 überwiegend auf NK-Zellen und einer Teilmenge von Monozyten exprimiert wird, sind Lysate aus angereicherten NK-Zellen (z. B. CD56-positive selektierte Zellen) oder monozytären Zelllinien (z. B. THP‑1) geeignete positive Kontrollen. Für Gewebsebenenanalysen sollten Sie berücksichtigen, dass die CD16-Expression relativ eingeschränkt ist und empfindliche Detektionsmethoden erfordern kann.

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