Anti-CD152/CTLA-4 Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P16410

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CTLA-4-Funktion und -Lokalisierung

• CTLA-4 (Cytotoxisches T-Lymphozyten-Protein 4, auch bekannt als CD152) ist ein transmembraner inhibitorischer Rezeptor und ein Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie. Es existiert als ein durch Disulfidbrücken verknüpftes Homodimer, wobei alternatives Spleißen eine lösliche Isoform ohne die Transmembrandomäne erzeugt.
• CTLA-4 fungiert als wichtiger negativer Regulator der T-Zell-Antworten, indem es als Decoy-Rezeptor wirkt. Es konkurriert mit dem stimulierenden Korezeptor CD28 um die Bindung an die B7-Familienliganden CD80 und CD86, mit erheblich höherer Affinität, und dämpft so die T-Zell-Aktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:11279501 PMID:11279502 PMID:16551244
• Das Protein ist in der Zellmembran lokalisiert und wird vorwiegend in lymphoiden Geweben exprimiert, mit den höchsten Spiegeln auf aktivierten T-Zellen. Die Oberflächenexpression auf aktivierten T-Zellen ist 30- bis 50-fach niedriger als die von CD28.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Phosphorylierung, die die Zelloberflächendynamik und Signalaktivität modulieren. Die extrazelluläre Domäne enthält eine einzelne IgV-ähnliche Domäne mit einer konservierten Disulfidbrücke.
• CTLA-4 ist mit Autoimmunerkrankungen wie Diabetes mellitus Typ 1 und systemischem Lupus erythematodes (SLE) verbunden, und genetische Varianten sind mit der Anfälligkeit für diese Störungen assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 36-161) von humanem CTLA-4, was diesen Antikörper für die Erkennung des nativen, membrangebundenen Rezeptors geeignet macht. Bei der Planung von Experimenten sollten Sie Lysate aktivierter T-Zellen oder Gewebe mit bekannter CTLA-4-Expression als positive Kontrollen in Betracht ziehen.
• Für Western Blotting (WB) kann unter reduzierenden Bedingungen eine Bande beobachtet werden, die ca. 25 kDa (monomere Form) entspricht; beachten Sie, dass die homodimere Form von ~50 kDa auch unter nicht-reduzierenden Bedingungen sichtbar sein kann.
• In der Immunhistochemie (IHC) kann eine Antigen-Retrieval mit Citratpuffer (pH 6,0) und Permeabilisierung die Erkennung verbessern. Es wurde berichtet, dass der Antikörper mit Maus- und Ratten-CTLA-4 kreuzreagiert; jedoch sollten die optimalen Arbeitsverdünnungen empirisch ermittelt werden.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie eine Kombination mit einem geeigneten Detektionsantikörper, der ein nicht überlappendes Epitop erkennt, in Betracht ziehen und dies in der relevanten Probenmatrix validieren.

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