Anti-CD146/MCAM Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC - P43121

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD146/MCAM Funktion und Lokalisierung

• CD146/MCAM (auch bekannt als MUC18, MelCAM, HEMCAM) ist ein Zelloberflächenglykoprotein, das durch das MCAM-Gen kodiert wird und zur Immunglobulin-Superfamilie der Adhäsionsmoleküle gehört.
• Es vermittelt kalziumunabhängige Zell-Zell-Adhäsion und ist entscheidend für die Aufrechterhaltung der Integrität der Endothelmonoschicht an den interzellulären Verbindungen.
• Seine Expression auf Melanomzellen erleichtert Wechselwirkungen mit dem vaskulären Endothel und fördert die hämatogene Ausbreitung und Metastasierung.
• Während der embryonalen Entwicklung kann CD146/MCAM als Adhäsionsmolekül in migrierenden Neuralleistenzellen fungieren.
• Die Bindung eines Liganden löst die Tyrosinphosphorylierung von FYN und PTK2/FAK1 sowie einen vorübergehenden Anstieg des intrazellulären Kalziums aus, was auf eine Rolle bei der Signaltransduktion hinweist.
• In normalen adulten Geweben ist die CD146/MCAM-Expression weitgehend auf glatte Muskelzellen der Gefäße und Endothelzellen beschränkt.
• Das Protein ist stark in fortgeschrittenen primären und metastasierten Melanomen exprimiert, wird aber selten in benignen Nävi nachgewiesen, was mit dem Tumorfortschritt korreliert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und N-verknüpfte Glykosylierung, und das Protein enthält disulfidverknüpfte Immunglobulin-ähnliche Wiederholungen sowie eine Transmembrandomäne.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 24-559) von humanem CD146/MCAM, was die Detektion des全长-Proteins und aller löslichen abgespaltenen Formen in geeigneten Proben vorhersehen lässt.
• Für den Western Blot liegt der vorhergesagte Band bei ~72 kDa; aufgrund der Glykosylierung kann jedoch das beobachtete Molekulargewicht höher sein. Ziehen Sie die Verwendung von denaturierenden und reduzierenden Bedingungen in Betracht.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte die Membranlokalisierung deutlich sein; schließen Sie eine geeignete Permeabilisierung ein, wenn intrazelluläre Epitope erreicht werden sollen, obwohl die Zielung der extrazellulären Domäne eine Färbung lebender Zellen ermöglichen kann.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sind möglicherweise Antigen-Retrieval-Methoden und Optimierungen erforderlich; eine Expression wird im vaskulären Endothel und im Melanomgewebe erwartet.
• Obwohl ELISA als Anwendung aufgeführt ist, kombinieren Sie es mit einem geeigneten Capture/Detektions-Antikörper; Endanwender sollten den Antikörper in ihrem spezifischen Assay-Format validieren.
• Die Kreuzreaktivität wurde für Mensch validiert; für andere Spezies führen Sie eine Sequenzhomologieanalyse und eine experimentelle Verifizierung durch.

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