Anti-CD146/MCAM Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P43121

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD146/MCAM

• CD146, auch bekannt als MUC18, MEL-CAM oder S-endo 1, ist ein Zelladhäsionsmolekül aus der Superfamilie der Immunglobuline.
• Es trägt zur Kohäsion des Endothelmonolayers an interzellulären Junktionen bei und kann die Interaktion von Melanomzellen mit Gefäßstrukturen fördern, was die hämatogene Metastasierung verstärkt.
• Es fungiert als Oberflächenrezeptor, der nach Bindung intrazelluläre Signale auslöst, einschließlich der Tyrosinphosphorylierung von FYN und PTK2/FAK1 sowie eines transienten Kalziumeinstroms.
• Das Protein ist ein durch die Membran tretendes Typ-I-Membranglykoprotein, das aus einem Signalpeptid, fünf Ig-ähnlichen Domänen, einer Transmembranhelix und einem zytoplasmatischen Bereich besteht.
• Es wird überwiegend in vaskulären Endothelzellen und glatten Muskelzellen exprimiert; es ist in fortgeschrittenen primären Melanomen und metastatischen Läsionen hochreguliert, wird aber selten in benignen Nävi nachgewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und stimulusinduzierte Tyrosinphosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Da das Immunogen (AS 547-646) innerhalb der zytoplasmatischen Domäne liegt, wird Permeabilisierung für IHC-P und ELISA-Formate mit nicht zugänglicher Zelloberfläche empfohlen.
• Für das Western Blotting ist unter reduzierenden Bedingungen eine Bande bei ca. 72 kDa zu erwarten; validieren Sie die Spezifität mit Positiv- (z. B. HUVEC-Lysat) und Negativkontrollen.
• Optimieren Sie bei der IHC-P die Antigenretrieval und die Antikörperverdünnung; erwägen Sie die Verwendung eines polymerbasierten Nachweissystems für höhere Empfindlichkeit.
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus und Ratte bietet Flexibilität für translationale Studien; überprüfen Sie die Leistung in Geweben der entsprechenden Spezies.
• Bestätigen Sie für ELISA, dass das Epitop im Assayformat zugänglich ist; die direkte Antigenbeschichtung kann eine Denaturierung erfordern, um die Peptidsequenz freizulegen.

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