Anti-CD141/Thrombomodulin Kaninchen monoklonaler Antikörper für IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA - P07204

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD141/Thrombomodulin-Funktion und -Lokalisierung

• Thrombomodulin (auch bekannt als Fetomodulin oder CD141) ist ein Endothelzellrezeptor, der eine entscheidende Rolle bei der Regulierung von Hämostase, Gerinnung, Fibrinolyse, Entzündung und Angiogenese spielt. Verwandte Referenzen: PMID:10761923

• Es dient als essentieller Kofaktor für die Thrombin-vermittelte Aktivierung von Protein C (PROC) und initiiert so den Antikoagulanzienweg auf vaskulären Endothelzellen. Verwandte Referenzen: PMID:29323190, PMID:33836597, PMID:9395524

• Thrombomodulin beschleunigt die Aktivierung von Plasma-Carboxypeptidase B2 (CPB2/TAFI), welche die Fibrinolyse hemmt, indem sie C-terminale basische Aminosäuren von Substraten wie Kinninen und Anaphylatoxinen entfernt. Verwandte Referenzen: PMID:26663133

• Es unterdrückt Entzündungen unabhängig von seiner gerinnungshemmenden Aktivität, indem es das proinflammatorische Molekül HMGB1 abfängt und so dessen Interaktion mit zellulären Rezeptoren wie RAGE verhindert. Verwandte Referenzen: PMID:15841214

• Thrombomodulin schützt auch die Endothelbarriereintegrität, indem es die Spaltungsspezifität des Protease-aktivierten Rezeptors 1 (PAR1) verändert und so die Endothelzellpermeabilität hemmt (nach Ähnlichkeit).

• Subzellulär ist Thrombomodulin hauptsächlich an der Plasmamembran lokalisiert, was mit seinen Rezeptorfunktionen übereinstimmt.

• Das Protein wird überwiegend in Endothelzellen exprimiert und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Hydroxylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 19–515), die alle EGF-ähnlichen Wiederholungen und die Lektin-ähnliche Domäne enthält; dieses Design führt wahrscheinlich zu Antikörpern, die native, oberflächenzugängliche Epitope erkennen, die für Durchflusszytometrie und Immunhistochemie geeignet sind.
• Für IHC-P sollten Sie in Betracht ziehen, mehrere Antigen-Retrieval-Methoden zu testen (z.B. hitzeinduziertes Epitop-Retrieval bei pH 6 oder 9) und die Antikörperkonzentration zu titrieren, um potenziellen Schwankungen bei der Gewebefixierung Rechnung zu tragen.
• Für IF/ICC sollten geeignete Permeabilisierungsschritte eingeschlossen werden, wenn intrazelluläre Pools anvisiert werden, und die Färbung mit einer negativen Kontrolle validiert werden, um membranspezifische Färbung zu bestätigen.
• Bei der Durchflusszytometrie sollte ein Live-Cell-Färbeprotokoll mit einem geeigneten fluorophor-konjugierten Sekundärantikörper verwendet werden, um unspezifische Bindung zu minimieren; die Leistung mit einer bekannten positiven Endothelzelllinie überprüfen.
• Für den ELISA-basierten Nachweis von löslichem Thrombomodulin in Plasma oder Serum sollte der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz in einem Sandwich-Format evaluiert werden, wobei potenzielle Matrixeffekte zu berücksichtigen sind.

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