Anti-CD13/ANPEP monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P15144

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Aminopeptidase N

• Die Aminopeptidase N (ANPEP, CD13) ist eine zinkabhängige Metalloprotease mit breiter Spezifität, die eine Schlüsselrolle bei der endgültigen Verdauung von Peptiden in der Bürstensaummembran von Darm und Niere spielt. Sie verarbeitet auch verschiedene Peptidhormone (z. B. Angiotensin III und IV), Neuropeptide und Chemokine.
• Das Enzym ist an der Antigenpräsentation beteiligt, indem es Peptide spaltet, die an MHC-Klasse-II-Moleküle auf antigenpräsentierenden Zellen gebunden sind, und kann den Aminosäuretransport möglicherweise durch Interaktion mit dem Transporter SLC6A19 regulieren.
• ANPEP fungiert als Rezeptor für das menschliche Coronavirus 229E (HCoV-229E) und vermittelt die Infektion mit dem menschlichen Cytomegalievirus (HCMV), was seine Rolle bei Wirt-Virus-Interaktionen unterstreicht.
• Subzellulär handelt es sich um ein Single-Pass-Typ-II-Membranprotein, das in der Zellmembran lokalisiert ist; eine lösliche Form wird auch im Plasma nachgewiesen und ist bei Krebspatienten erhöht.
• Die Gewebeexpression ist breit gefächert und umfasst Niere, Darm, Atemwegsepithel, myeloische Zellen, Endothelzellen, synaptische Membranen des ZNS und angiogene Gefäße; sie findet sich in verschiedenen Tumortypen und Lymphknotenmetastasen.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören umfangreiche N-Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Sulfatierung, die zum ausgereiften Molekulargewicht von ca. 110 kDa beitragen.
• Zusätzliche Schlüsselwörter: Angiogenese, Cholesterinkristallisation, Signalanker, Transmembranhelix und Wirtszellrezeptor für den Viruseintritt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der zentralen extrazellulären Domäne (aa 350-450), einer Region, die wahrscheinlich gut präsentiert ist und über Mensch, Maus und Ratte hinweg konserviert ist; berücksichtigen Sie dies bei Kreuzreaktivitätsstudien.
• Für Western Blot ist ein spezifisches Band um 110 kDa zu erwarten; validieren Sie mit positiven Kontrollen wie Lysaten aus menschlicher Niere oder Darm und verwenden Sie für Maus/Ratte Nieren- oder Lungengewebeextrakte.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) sollte eine membranöse Färbung beobachtet werden; erwägen Sie eine Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) und testen Sie Antikörperverdünnungen beginnend bei 1:50–1:200 an normalen Nieren- oder Tumorschnitten.
• Für die Immunfluoreszenz (Paraffin) optimieren Sie die Fixierung und Permeabilisierung; ein punktförmiges (punctate) membranöses Muster wird erwartet.
• ELISA-Anwendungen können für die Detektion von löslichem CD13 entwickelt werden; evaluieren Sie die Paarung mit einem Detektionsantikörper im Sandwich-Format und verwenden Sie rekombinantes Protein oder Patientenplasma für Standardkurven.

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