Anti-CD13 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P97449

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD13-Funktion und Lokalisierung

• CD13 (Cluster of Differentiation 13), auch als Aminopeptidase N (AP-N) bezeichnet, ist eine Typ-II-Integralmembran-Zink-abhängige Metalloprotease, die allgemein als Alanyl-Aminopeptidase bekannt ist. Alternative Namen sind Aminopeptidase M und Membranprotein p161.
• Als breitspezifische Aminopeptidase katalysiert CD13 die Entfernung von N-terminalen Aminosäuren aus Peptiden und trägt so zu den Endstadien der Proteindigestion und der Verarbeitung regulatorischer Peptide wie Angiotensin III/IV, Neuropeptide und Chemokine bei (By similarity).
• In antigenpräsentierenden Zellen ist CD13 an der Trimmung von Peptiden beteiligt, die an Haupthistokompatibilitätskomplex-Klasse-II-Moleküle gebunden sind, ein Prozess, der adaptive Immunantworten beeinflussen kann (PubMed:8691132). Verwandte Referenzen: PMID:8691132
• Es wurde berichtet, dass CD13 eine Rolle bei der Aminosäurehomöostase spielt, indem es mit dem Aminosäuretransporter SLC6A19 interagiert und dessen Aktivität an der Plasmamembran moduliert (PubMed:22677001). Verwandte Referenzen: PMID:22677001
• Vorwiegend an der Zelloberfläche lokalisiert, wird CD13 in einer Vielzahl von Geweben exprimiert, einschließlich des intestinalen Bürstensaums, der Nierenproximaltubuli, der Leber, der Lymphknoten, der Milz, des Gehirns und auf Zellen der Monozyten-Makrophagen-Linie, dendritischen Zellen und B-Lymphozyten, jedoch nicht auf T-Zellen.
• Das Protein unterliegt N-verknüpfter Glykosylierung, Tyrosinsulfatierung und Phosphorylierung; es enthält auch Disulfidbrücken und ein im aktiven Zentrum koordiniertes Zinkion, was mit seiner Metalloprotease-Funktion übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen ein großes extrazelluläres Fragment (Aminosäuren 69–966) abdeckt, erkennt der resultierende polyklonale Antikörper wahrscheinlich mehrere Epitope und kann sowohl natives als auch denaturiertes CD13 nachweisen.
• Beim Western Blot wandert CD13 aufgrund der N-verknüpften Glykosylierung typischerweise als breites Band oberhalb der vorhergesagten 109 kDa; die Optimierung des Gelprozentsatzes und der Transferbedingungen wird empfohlen.
• Für IHC-P sollte die optimale Antigen-Demaskierung empirisch bestimmt werden; gängige Protokolle umfassen hitzeinduzierte Epitop-Demaskierung in Citrat- (pH 6) oder EDTA- (pH 9) Puffern.
• Der Antikörper ist mit ELISA-Anwendungen kompatibel; als polyklonales Reagenz kann er als Capture- oder Detektionsantikörper in der Immunoassay-Entwicklung dienen.
• Angesichts der berichteten Kreuzreaktivität mit humanem und Ratten-CD13 ist eine Validierung in der Zielspezie und der Probenmatrix für die Assayspezifität unerlässlich.

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