Anti-CD11b (ITGAM) polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P05555

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD11b

• Integrin alpha-M (CD11b), kodiert durch das Itgam-Gen, gehört zur Familie der Integrin-alpha-Ketten und verbindet sich mit der Beta-2-Untereinheit (ITGB2/CD18) zur Bildung des Komplementrezeptors CR3 (Mac-1). Alternatives Spleißen führt zur Bildung mehrerer Isoformen.
• Das ITGAM/ITGB2-Integrin vermittelt adhäsive Wechselwirkungen von Monozyten, Makrophagen und Granulozyten, einschließlich der Bindung an das iC3b-Fragment des Komplementfaktors C3, und erleichtert die Aufnahme von komplementbeschichteten Partikeln und Krankheitserregern (gemäß Ähnlichkeit).
• Neben dem Komplement dient CD11b als Rezeptor für Fibrinogen, Faktor X und ICAM1. Es erkennt RGD-Motive sowie die P1/P2-Peptide der Fibrinogen-Gammakette und fördert dadurch die Leukozytenadhäsion und -migration.
• Der Rezeptor spielt eine zentrale Rolle bei der Migration von Neutrophilen und ist zusammen mit CD18 für die durch CD177-PRTN3 vermittelte Aktivierung von TNF-primierten Neutrophilen erforderlich (gemäß Ähnlichkeit).
• Er kann die durch Phagozytose induzierte Apoptose extravasierter Neutrophiler regulieren und dadurch zur Auflösung von Entzündungsprozessen beitragen (gemäß Ähnlichkeit).
• Im Gehirn ist CD11b zusammen mit TYROBP/DAP12 in Mikroglia für die Produktion von Superoxidionen erforderlich, die eine entwicklungsbedingte neuronale Apoptose auslösen. Zugehörige Referenzen: PMID:18685038
• Auf subzellulärer Ebene ist CD11b an der Zellmembran lokalisiert und in Membran-Rafts angereichert.
• Die gewebespezifische Expression findet überwiegend in Monozyten, Granulozyten, einer Untergruppe peritonealer Mastzellen und in Mikroglia statt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 143–337 des CD11b der Maus und deckt einen Teil der extrazellulären N-terminalen Region ab. Dieses Design kann die Erkennung sowohl nativer als auch denaturierter Proteinkonformationen ermöglichen und macht den Antikörper für Western Blot, Immunhistochemie und ELISA geeignet.
• Bei der Western-Blot-Analyse wandert CD11b bei etwa 127 kDa. Es wird empfohlen, ein 6–12%iges SDS-PAGE-Gel und geeignete Positivkontrollen (z. B. Lysate von Makrophagen oder Granulozyten) zu verwenden, um die Spezifität zu überprüfen.
• Aufgrund der vorhergesagten Glykosylierung und der durch Disulfidbrücken stabilisierten Struktur können reduzierende Bedingungen und eine optimierte Probenvorbereitung die Detektion beeinflussen. Validieren Sie den Antikörper im relevanten Probensystem, um seine Leistungsfähigkeit zu bestätigen.
• Für diesen Antikörper wurde eine Kreuzreaktivität mit CD11b des Menschen und der Ratte berichtet. Sequenzunterschiede können jedoch die Affinität in diesen Spezies beeinflussen. Daher wird eine unabhängige Validierung in der Zielspezies empfohlen.
• Für IHC-P-Anwendungen sollten Protokolle zur Antigen-Retrieval und Methoden zur Gewebefixierung an den jeweiligen Probentyp angepasst werden, um das bestmögliche Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.
• Im ELISA kann der Antikörper zum Einfangen oder Nachweis von CD11b verwendet werden. Erwägen Sie, ihn in einem Sandwich-ELISA-Format mit einem kompatiblen monoklonalen Antikörper zu kombinieren, um die Empfindlichkeit zu erhöhen.

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