Anti-CD117/c-Kit Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – P05532

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD117/c-Kit

• Proteinidentität: CD117/c-Kit ist der Mastzellen-/Stammzell-Wachstumsfaktor-Rezeptor Kit, eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die vom Kit-Gen kodiert wird (Maus GeneID: 16590). Er wird auch als Protoonkogen c-Kit bezeichnet.
• Kernfunktion: Er wirkt als Zelloberflächenrezeptor für das Zytokin KITLG/SCF und spielt eine wesentliche Rolle bei Zellüberleben, Proliferation, Hämatopoese, Erhaltung von Stammzellen, Gametogenese, Entwicklung, Migration und Funktion von Mastzellen sowie der Melanogenese.
• Signalwege: Nach der Bindung von SCF aktiviert KIT mehrere Signalkaskaden, darunter PI3K/AKT, RAS/MAPK, PLCγ-vermittelte Kalziummobilisierung sowie JAK/STAT-Signalwege. Es phosphoryliert zentrale Adaptorproteine und Enzyme wie PIK3R1, PLCG1, CBL und SRC.
• Isoformen und Gewebespezifität: Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen. Isoform 1 wird breit exprimiert (fötale Leber, Knochenmark). Isoform 3 ist in hämatopoetischen Stammzellen angereichert. Der Proteinnachweis zeigt Isoform 1 und 2 in Knochenmark, Spermatogonien und Spermatozyten; Isoform 3 in runden/verlängerten Spermatiden und Spermatozoen.
• Subzelluläre Lokalisation: Hauptsächlich an der Zellmembran lokalisiert; auch im Zytoplasma nachweisbar.
• Posttranslationelle Modifikationen und wichtige strukturelle Merkmale: Der Rezeptor ist ein Glykoprotein mit Disulfidbindungen, Immunglobulindomänen und einer zytoplasmatischen Tyrosinkinasedomäne. Er erfährt Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die die Signalübertragung und Degradation regulieren.
• Schlüsselwörter: Protoonkogen, Tyrosinprotein kinase, ATP-bindend, magnesium/metallbindend, Transmembranhelix, Ubl-Konjugation, Wiederholung, Signal.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein entsprechend der Sequenz von Maus-CD117/c-Kit. Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht des Volllängenproteins ~109 kDa; typischerweise wird eine Bande um diese Größe beobachtet. Das angegebene Proteingewicht weist zudem 23 kDa aus, was wahrscheinlich dem rekombinanten Fragment entspricht.
• Bei der Durchführung von WB sollten Sie reduzierende Bedingungen und geeignete Positivkontrollen (z. B. Lysate von Maus-Mastzellen oder hämatopoetischen Zellen) verwenden. Die endogene Expression in Geweben muss im jeweiligen Probensystem überprüft werden.
• Für ELISA kann das rekombinante Immunogen als Beschichtungsantigen oder Standard verwendet werden, aber optimale Beschichtungsbedingungen und Nachweisbereiche müssen empirisch bestimmt werden.
• Validieren Sie die Leistung des Antikörpers in Ihrer spezifischen Anwendung und Probematrix, da Bedingungen Spezifität und Empfindlichkeit beeinflussen können.

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