Anti-CD117/c-Kit monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10721

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD117/c-Kit Funktion und Lokalisierung

• Der Mast-/Stammzell-Wachstumsfaktor-Rezeptor Kit (auch bekannt als SCFR, c-Kit, CD117, PBT) ist eine Tyrosin-Protein-Kinase, die durch das KIT-Gen kodiert wird, ein Proto-Onkogen mit mehreren Isoformen.
• Fungiert als Zelloberflächenrezeptor für den Stammzellfaktor (KITLG/SCF) und reguliert Zellüberleben, Proliferation, Hämatopoese, Stammzellerhalt, Gametogenese, Mastzellentwicklung, Migration und Melanogenese.
• Nach Ligandenbindung phosphoryliert sich KIT selbst und aktiviert nachgeschaltete Signalkaskaden, einschließlich PI3K/AKT1, RAS/RAF/MAPK, PLCγ/PKC und JAK/STAT-Wege.
• Lokalisiert an der Zellmembran, kann aber auch im Zytoplasma gefunden werden und unterliegt ligandengesteuerter Internalisierung und Degradation.
• Im Hoden in Spermatogonien der Basalschicht und in interstitiellen Leydig-Zellen nachweisbar, nicht jedoch in Sertoli-Zellen oder Spermatozyten innerhalb der Samenkanälchen. Die Expression bleibt in ejakulierten Spermatozoen erhalten. Verwandte Referenzen: PMID:20601678
• Wichtige strukturelle Merkmale umfassen immunoglobulinähnliche Domänen, eine Transmembranhelix, eine intrazelluläre Kinasedomäne sowie Stellen für Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung.
• Bei verschiedenen Krebsarten und Erkrankungen involviert; Mutationen sind mit Piebaldismus, gastrointestinalen Stromatumoren und Mastozytose assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid der Aminosäuren 871–976 von humanem CD117/c-Kit hergestellt. Das Epitop liegt innerhalb der intrazellulären C-terminalen Region, die unter denaturierenden Bedingungen (WB) oder nach geeigneter Fixierung/Permeabilisierung für ICC und IHC zugänglich sein kann.
• Für Western Blot ist ein Band bei etwa 110 kDa zu erwarten. Verwenden Sie ein reduzierendes SDS-PAGE-Probenpuffer und validieren Sie die Detektion mit einer bekannten CD117-positiven Zelllinie (z.B. HMC-1, K562).
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC‑P) können Antigen-Retrieval (z.B. hitzeinduziertes Epitop-Retrieval in Citratpuffer pH 6.0) und Blockade endogener Peroxidaseaktivität erforderlich sein. Optimieren Sie die Primärantikörperkonzentration und Inkubationsbedingungen.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsantikörper verwendet werden. Die Paarung mit einem validierten Liganden- oder Antikörperset wird empfohlen; bestätigen Sie die Spezifität mit rekombinantem CD117-Protein.

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