Anti-CBFB Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13951

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CBFB-Funktion und Lokalisation

• Kodiert durch das CBFB-Gen, ist die Core-binding factor subunit beta eine Transkriptionsfaktor-Untereinheit, die einen heterodimeren Komplex mit RUNX-Familienproteinen (RUNX1, RUNX2, RUNX3) bildet, der als Core-binding factor (CBF) bekannt ist. CBFB verstärkt allosterisch die DNA-Bindungsaffinität der RUNX-Transkriptionsfaktoren.
• CBF-Komplexe binden an die Kernkonsensussequenz 5′-TGTGGT-3′ in Enhancern und Promotoren verschiedener Gene, einschließlich murinem Leukämievirus, Polyomavirus-Enhancer, T-Zell-Rezeptor-Enhancer, LCK, IL3 und GM-CSF, und regulieren so die Transkription.
• Während der Entwicklung zytotoxischer (CD8+) T-Zellen wirken CBF-Komplexe als transkriptionelle Silencer, indem sie an die RUNX-Bindungssequenz im ZBTB7B-Locus binden und dessen Expression unterdrücken, um die Differenzierung zu ermöglichen.
• CBFB wird vom HIV-1 Vif-Protein adressiert, das es rekrutiert, um einen Cullin-5-RING E3 Ubiquitin-Protein-Ligase-Komplex (ECS-Komplex) zu bilden, der die Ubiquitinierung und den Abbau von APOBEC3F und APOBEC3G katalysiert (PubMed:22190037, PubMed:31792451, PubMed:36598981). Der Komplex kann auch APOBEC3H in gewissem Maße ubiquitinieren (PubMed:37640699). Die Vif-Assoziation hemmt auch die Koaktivator-Aktivität von CBFB (PubMed:22190037). Verwandte Referenzen: PMID:22190037 PMID:31792451 PMID:36598981 PMID:37640699
• Die subzelluläre Lokalisation ist überwiegend nukleär, was mit seiner Rolle in der Transkriptionsregulation übereinstimmt.
• Schlüsselwörter von UniProt heben seine Beteiligung an alternativem Spleißen, chromosomalen Umlagerungen (z.B. inv(16) bei akuter myeloischer Leukämie), proto-onkogenem Potenzial und Krankheitsassoziationen einschließlich Zwergwuchs hervor. Es handelt sich auch um ein Phosphoprotein.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1-182 des humanen CBFB abdeckt. Dieser N-terminale Teil enthält die für die RUNX-Interaktion notwendige konservierte Domäne und ist bei Maus und Ratte identisch oder sehr ähnlich, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande nahe 22 kDa zu erwarten. Ziehen Sie die Verwendung von Kernextrakten und geeigneten Ladekontrollen in Betracht.
• Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) sollten eine nukleäre Lokalisation zeigen. Validieren Sie dies in bekannten CBFB-exprimierenden Zelllinien oder Geweben.
• ELISA kann für quantitative Analysen verwendet werden; optimale Beschichtungsbedingungen und Antikörperkonzentrationen sollten empirisch bestimmt werden.
• Wie bei jedem Antikörper sollten Sie ihn im spezifischen experimentellen Kontext validieren und gegebenenfalls Präadsorptionskontrollen in Betracht ziehen.

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