Anti-Cation-unabhängiger M6PR (IGF2R) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P11717

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Cation-unabhängigem M6PR (IGF2R)

• Cation-unabhängiger M6PR (IGF2R), auch als 300 kDa Mannose-6-Phosphat-Rezeptor (MPR300) oder Insulin-like growth factor 2 Rezeptor bezeichnet, ist ein großes transmembranes Glykoprotein, das durch das IGF2R-Gen kodiert wird.
• Er vermittelt den Transport phosphorylierter lysosomaler Enzyme vom Golgi-Komplex und der Zelloberfläche zu Lysosomen. Lysosomale Enzyme mit Phosphomannosylresten binden spezifisch an den Rezeptor, und der Rezeptor-Ligand-Komplex wird internalisiert und dissoziiert im sauren prä-lysosomalen Kompartiment. Der Rezeptor wird dann über den Retromer-Komplex zurück zum Golgi recycelt. Verwandte Referenzen: PMID:18817523, PMID:2963003
• Zusätzlich zu seiner M6P-abhängigen Transportfunktion bindet IGF2R mit hoher Affinität an Insulin-like growth factor 2 (IGF2) und fungiert als Clearance-Rezeptor, der die extrazellulären IGF2-Spiegel reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:18046459
• IGF2R wirkt als positiver Regulator der T-Zell-Koaktivierung durch Bindung an Dipeptidylpeptidase 4 (DPP4). Verwandte Referenzen: PMID:10900005
• Der Rezeptor zirkuliert dynamisch zwischen der Golgi-Apparat-Membran und endosomalen Kompartimenten, eine Lokalisierung, die für seine Sortier- und Transportfunktionen wesentlich ist.
• IGF2R ist umfangreich posttranslational modifiziert, mit Glykosylierung, Disulfidbrücken, Acetylierung, Methylierung, Palmitoylierung und Phosphorylierung. Seine Struktur umfasst ein Signalpeptid, 15 extrazytoplasmatische Wiederholungen, eine einzelne Transmembranhelix und einen kurzen cytoplasmatischen Schwanz.
• Das reife Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 274 kDa, was mit seiner Bezeichnung als MPR300 übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer C-terminalen Region (aa 2140-2300), was die Detektion von vollständigem IGF2R begünstigen kann. Erwägen Sie die Verwendung von lysosomenreichem Gewebe oder Zelllinienlysaten (z.B. Leber, Plazenta oder Fibroblasten) als positive Kontrollen für Western Blot.
• Aufgrund der großen Proteingröße (274 kDa) verwenden Sie ein Gel mit niedrigem Polyacrylamidanteil (6–8%) und verlängerte Nass-Transfer-Bedingungen (z.B. über Nacht bei 4°C) auf eine PVDF-Membran. Fügen Sie vorab gefärbte Hochmolekulargewichtsmarker hinzu, um die Transfereffizienz zu überwachen.
• Für IHC-P führen Sie eine geeignete Antigen-Demaskierung durch und optimieren Sie die Primärantikörper-Verdünnung. Schließen Sie positive und negative Gewebekontrollen ein, um die Färbespezifität in humanen und Rattenproben zu validieren.
• ELISA-Anwendungen können von rekombinanten Proteinstandards profitieren, um quantitative Assays einzurichten. Wenn experimentelle Designs Nagetiermodelle beinhalten, validieren Sie die Kreuzreaktivität in Rattensystemen.
• Validieren Sie den Antikörper stets in Ihrem spezifischen experimentellen Kontext, da die Leistung je nach Probenvorbereitung und Assay-Bedingungen variieren kann.

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