Anti-Kationen-unabhängiger M6PR (IGF2R) Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P11717

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des kationen-unabhängigen M6PR (IGF2R)

• Der kationen-unabhängige Mannose-6-Phosphat-Rezeptor (CI-M6PR), auch bekannt als Insulin-like Growth Factor 2 Rezeptor (IGF2R), CD222 oder MPR300, wird beim Menschen durch das IGF2R-Gen kodiert. Es handelt sich um einen großen multifunktionalen Transmembranrezeptor, der eine entscheidende Rolle im Transport lysosomaler Enzyme und der Clearance von Wachstumsfaktoren spielt.
• Mittelt den Transport neu synthetisierter phosphorylierter lysosomaler Enzyme vom Golgi-Komplex zu Lysosomen. Er bindet Phosphomannosyl-Reste an diesen Enzyme, und der Rezeptor-Ligand-Komplex wird in ein saures prälisosomales Kompartiment transportiert, wo die Dissoziation erfolgt. Der Rezeptor wird anschließend über den Retromer-Komplex zurück zum Golgi recycelt. Verwandte Referenzen: PMID:18817523 PMID:2963003
• Bindet Insulin-like Growth Factor 2 (IGF2) mit hoher Affinität, was zur Internalisierung und lysosomalen Degradation von IGF2 führt. Diese Funktion reguliert die IGF-Signalübertragung negativ und begrenzt das fötale Wachstum. Verlust der Prägung oder Mutationen im IGF2R werden mit Krebserkrankungen und Entwicklungsstörungen in Verbindung gebracht. Verwandte Referenzen: PMID:18046459
• Wirkt als positiver Regulator der T-Zell-Koaktivierung durch Bindung an Dipeptidylpeptidase 4 (DPP4/CD26) an der Zelloberfläche, was eine Verbindung zwischen metabolischen und immunologischen Funktionen herstellt. Verwandte Referenzen: PMID:10900005
• Lokalisiert sich hauptsächlich an der Membran des Golgi-Apparats und der Endosomenmembran, wo es zwischen dem trans-Golgi-Netzwerk, Endosomen und der Plasmamembran zyklisiert, um Fracht intrazellulär und an der Zelloberfläche einzufangen.
• Erfährt mehrere posttranslationale Modifikationen, darunter Acetylierung, Phosphorylierung, Palmitoylierung und Methylierung. Er enthält Disulfidbindungen, ist stark glykosyliert und wird über eine einzelne Transmembranhelix an Membranen verankert. Diese Merkmale sind entscheidend für seine Stabilität, seinen Transport und seine Ligandenbindungsfunktionen.
• Das reife Protein hat eine scheinbare Molekularmasse von etwa 274 kDa, was mit der vorausgesagten Masse aus seiner Aminosäuresequenz übereinstimmt. Seine große extrazelluläre Domäne besteht aus 15 sich wiederholenden Einheiten, die an der Bindung von Mannose-6-Phosphat und IGF2 beteiligt sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen war ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 2327–2491 im C-terminalen Bereich des Rezeptors umfasst. Dieses Design kann die Erkennung von volllängen CI-M6PR (IGF2R) in seiner nativen Konformation begünstigen.
• Angesichts der hohen Molekularmasse (~274 kDa) empfehlen wir die Verwendung von SDS-PAGE-Gelen mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6%iges Trenngel) und verlängerten Transferzeiten oder nass Transfermethoden, um eine effiziente Blottierung des Zielproteins sicherzustellen.
• Dieser Antikörper ist ein Kaninchen-polyklonaler Antikörper; er kann aufgrund der Erkennung mehrerer Epitope zusätzliche Banden nachweisen. Validieren Sie die Spezifität durch Vergleich der Signalintensitäten zwischen Kontroll- und IGF2R-Knockdown/Knockout-Lysaten.
• Für Immunofluoreszenz bestätigen Sie, dass das Färbemuster mit etablierten Golgi/Endosomen-Markern übereinstimmt. Permeabilisierungsbedingungen sollten optimiert werden, da das Epitop intrazellulär liegt.
• Bei ELISA-Anwendungen verwenden Sie das rekombinante Immunogen als Positivkontrolle, um die Bindungsaktivität zu bewerten. Extrapolieren Sie quantitative Nachweisgrenzen nicht allein aus den Produktspezifikationen; empirische Titration wird empfohlen.

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