Anti-Cathepsin-L/V/K/H-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P07711

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Cathepsin L

• Procathepsin L (Cathepsin L1) ist eine lysosomale Cysteinprotease, die vom CTSL-Gen kodiert wird und auch als Major Excreted Protein (MEP) bekannt ist. Eine alternative Initiation erzeugt Isoformen mit oder ohne Signalpeptid, was zu einer nukleären oder lysosomalen Lokalisation führt.
• Es fungiert als Thiolprotease, die für den allgemeinen Proteinabbau in Lysosomen, die Antigenverarbeitung, den Knochenumbau und die Freisetzung von Schilddrüsenhormonen durch Proteolyse von Thyreoglobulin entscheidend ist.
• Extrazellulär wirkt es bei neutralem pH-Wert als wichtigstes Elastin-abbauendes Enzym und erzeugt Endostatin aus COL18A1, wodurch es während Entzündungen zum Umbau der extrazellulären Matrix beiträgt. Zugehörige Referenzen: PMID:10716919
• Es erleichtert den Eintritt von Coronaviren (SARS-CoV, SARS-CoV-2) und Ebolavirus in Wirtszellen, indem es virale Spike-Glykoproteine in Lysosomen über einen langsamen, säureaktivierten Weg proteolytisch aktiviert. Zugehörige Referenzen: PMID:16339146 PMID:18562523 PMID:32142651 PMID:16081529 PMID:26953343
• Es reguliert den Ablauf des Zellzyklus durch proteolytische Prozessierung des Transkriptionsfaktors CUX1; nukleäre Isoformen ohne Signalpeptid spalten CUX1 und modulieren dadurch die Genexpression. Zugehörige Referenzen: PMID:15099520
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Lysosomen, apikale Zellmembranen, sekretorische Vesikel (Chromaffin-Granula) und den extrazellulären Raum; außerdem kommt es im Zellkern vor, wenn es von nachgeschalteten Startstellen translatiert wird.
• Es wird posttranslational durch Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung modifiziert und als inaktives Zymogen synthetisiert, das proteolytisch zum reifen aktiven Enzym verarbeitet wird.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 114-333 des humanen Cathepsins L, einer Region innerhalb der reifen Proteasedomäne, was zur Kreuzreaktivität mit den Orthologen von Maus und Ratte beitragen kann.
• Beim Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht der Proform etwa 38 kDa; reife, prozessierte Formen können jedoch kleiner erscheinen. Fügen Sie während der Probenvorbereitung geeignete Proteaseinhibitoren hinzu.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie die Permeabilisierungsbedingungen berücksichtigen, um lysosomale oder nukleäre Pools nachzuweisen, und die Lokalisation mit Organellenmarkern validieren.
• Für ELISA-Anwendungen kann eine Optimierung der Beschichtungsbedingungen und der Antikörperverdünnung erforderlich sein; verwenden Sie rekombinante Proteine oder Peptidstandards als Positivkontrollen.
• Aufgrund der alternativen Initiation können mehrere Isoformen vorhanden sein; überprüfen Sie die Bandenmuster in Ihrem Zell- oder Gewebesystem mithilfe geeigneter Kontrollen.

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