Anti-Cathepsin L monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P07711

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Cathepsin L

• Procathepsin L (Cathepsin L1/MEP) ist eine lysosomale Thiolprotease, die eine zentrale Rolle beim Proteinabbau, der Antigenprozessierung und der Knochenumbildung spielt (wahrscheinlich).
• Alternative Translationsinitiation erzeugt nukleäre Isoformen, die den Transkriptionsfaktor CUX1 spalten und den Zellzyklusverlauf regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:15099520
• In der Schilddrüse löst es Thyroglobulin für die Freisetzung von T4-Hormon; in neuroendokrinen Zellen verarbeitet es Proenkephalin zu Enkephalin.
• Sekretiertes Cathepsin L erzeugt Endostatin aus Kollagen XVIII und wirkt als Elastase, die extrazelluläre Matrix bei Entzündungen abbaut. Verwandte Referenzen: PMID:10716919
• Erleichtert den Eintritt von SARS-CoV, SARS-CoV-2 und anderen Viren durch proteolytische Aktivierung von Spike-Glykoproteinen in Lysosomen. Verwandte Referenzen: PMID:32142651, PMID:16339146, PMID:18562523
• Subzellulär kommt es in Lysosomen, Sekretionsvesikeln, apikalen Zellmembranen, extrazellulärem Raum und im Zellkern vor; es ist als reifes Enzym aktiv nach proteolytischer Entfernung des Propeptids.
• Gehört zur Papain-Familie (C1) der Cysteinproteasen; es ist ein Glykoprotein mit Disulfidbindungen, wird als Zymogen synthetisiert und durch niedrigen pH-Wert oder andere Proteasen aktiviert.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen (AA 100–200) befindet sich im N-terminalen Bereich von menschlichem Procathepsin L; das Epitop kann sowohl im Proenzym als auch im reifen Enzym exponiert sein, aber Anwender sollten die Spezifität für die gewünschte Form bestätigen.
• Für Western Blot wird die Hauptbande bei ~38 kDa (Procathepsin L) erwartet; unter reduzierenden Bedingungen kann auch die reife schwere Kette (~25 kDa) nachgewiesen werden. Optimieren Sie Beladung und Lysebedingungen, um Autolyse zu minimieren.
• Bei IHC-P verwenden Sie hitzeinduzierte Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0) und validieren Sie mit positiven Geweben, die bekanntermaßen Cathepsin L exprimieren (z. B. Leber, Plazenta). Fügen Sie eine Isotypkontrolle hinzu.
• Für ELISA erwägen Sie die Paarung mit einem anderen monoklonalen oder polyklonalen Antikörper gegen das Ziel, um einen Sandwich-Assay aufzubauen, und validieren Sie Linearität und Wiederfindung in Ihrer Matrix.

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