Kaninchen-polyklonaler Anti-Cathepsin-G-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P08311

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Cathepsin G

• Cathepsin G (CTSG) ist eine Serinprotease mit trypsin- und chymotrypsinähnlicher Spezifität, die bevorzugt nach Phe, Tyr, Trp und Leu an der P1-Position spaltet und eine Präferenz für negativ geladene Reste an P2′ zeigt (PubMed:29652924, PubMed:8194606).
  Zugehörige Referenzen: PMID:29652924 PMID:8194606

• Es weist eine starke antimikrobielle Aktivität gegen gramnegative (N. gonorrhoeae, P. aeruginosa) und grampositive (L. monocytogenes, S. aureus) Bakterien sowie gegen M. tuberculosis auf, die weitgehend unabhängig von seiner Proteasefunktion ist (PubMed:2116408, PubMed:2117044, PubMed:1937776, PubMed:15385470).
  Zugehörige Referenzen: PMID:2116408 PMID:2117044 PMID:1937776 PMID:15385470

• Cathepsin G moduliert die adaptive und angeborene Immunität, indem es an B-Zellen sowie CD4⁺- und CD8⁺-T-Zellen bindet und diese stimuliert und durch seine enzymatische Aktivität die Zytotoxizität von NK-Zellen verstärkt (PubMed:7842483, PubMed:9000539, PubMed:9536127).
  Zugehörige Referenzen: PMID:7842483 PMID:9000539 PMID:9536127

• Die Protease wird für die durch den F2RL3/PAR4-Rezeptor vermittelte Rekrutierung und Aktivierung von Blutplättchen benötigt; außerdem induziert sie direkt die Aggregation von Blutplättchen, ein Effekt, der durch die neutrophile Elastase (ELANE) stark verstärkt wird (PubMed:10702240, PubMed:3390156, PubMed:25211214, PubMed:9111081).
  Zugehörige Referenzen: PMID:10702240 PMID:3390156 PMID:25211214 PMID:9111081

• Es spaltet ein breites Spektrum physiologischer Substrate, darunter Komplement C3, den Thrombinrezeptor F2R/PAR1 (je nach Spaltstelle als Agonist oder Inhibitor), die Gerinnungsfaktoren F8 und F10, die proinflammatorischen Zytokine IL36G und IL33 sowie das Leukozytenoberflächenprotein CD43 (PubMed:1861080, PubMed:7744748, PubMed:18217133, PubMed:8920993, PubMed:30804664, PubMed:22307629, PubMed:18586676).
  Zugehörige Referenzen: PMID:1861080 PMID:7744748 PMID:18217133 PMID:8920993 PMID:30804664 PMID:22307629 PMID:18586676

• Das Protein kommt in mehreren subzellulären Kompartimenten vor, darunter in den zytoplasmatischen Granula von Neutrophilen; es wird extrazellulär sezerniert und außerdem in der Zellmembran, im Zytoplasma, im Zytosol, in Lysosomen und im Zellkern nachgewiesen.

• Die Gewebeexpression findet überwiegend in Neutrophilen (auf Proteinebene) und in geringerem Maße in B-Zellen statt (PubMed:3799965, PubMed:15100291).
  Zugehörige Referenzen: PMID:3799965 PMID:15100291

• Cathepsin G ist ein Glykoprotein mit intramolekularen Disulfidbindungen; es wird als inaktives Zymogen synthetisiert und proteolytisch zum reifen Enzym verarbeitet.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Beim Western Blot (WB) wird erwartet, dass der Antikörper eine Bande nahe 29 kDa erkennt, die dem reifen Cathepsin G entspricht; auch Proformen oder unterschiedlich glykosylierte Varianten können beobachtet werden. Wir empfehlen, die Probenvorbereitung und Beladungskonzentrationen für Ihr spezifisches Modellsystem zu optimieren.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) kann eine hitzevermittelte Antigen-Retrieval-Methode (z. B. mit Citrat- oder EDTA-Puffer, pH 6,0 oder 9,0) die Färbung verbessern. Validieren Sie den Antikörper an positiven Kontrollgeweben, von denen bekannt ist, dass sie Cathepsin G exprimieren (z. B. humane Tonsille oder Milz), und verwenden Sie gleichzeitig negative Kontrollen.
• Für ELISA kann die polyklonale Beschaffenheit eine hohe Sensitivität bieten; es ist jedoch entscheidend, die Konsistenz zwischen Chargen und eine mögliche Kreuzreaktivität zu prüfen. Sowohl die Kombination mit einem geeigneten Fangantikörper als auch die Verwendung als Detektionsreagenz sind praktikable Strategien.
• Das Immunogen liegt innerhalb der katalytischen Domäne (AS 75–190), was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich sowohl das Proenzym als auch das reife Enzym erkennt. Daher ist bei der Interpretation von Daten aus Systemen, in denen Pro-Cathepsin G in großen Mengen vorhanden ist, besondere Vorsicht geboten.

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