Anti-Kathepsin E (CTSE) Kaninchen-polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P14091

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Kathepsin E

• Kathepsin E, auch bekannt als CATE, ist eine Aspartylprotease, die zur A1-Familie der Peptidasen gehört. Es wird als Zymogen produziert und durch autokatalytische Spaltung unter sauren Bedingungen aktiviert.
• Die primäre Funktion von Kathepsin E liegt in Immunantworten, wo es wahrscheinlich antigene Peptide für die MHC-Klasse-II-vermittelte Antigenpräsentation prozessiert und eine Schlüsselrolle in der adaptiven Immunität spielt.
• Im Thymus kann Kathepsin E zur aktivierungsinduzierten Lymphozytenverarmung beitragen und die T-Zellentwicklung und zentrale Toleranz beeinflussen.
• Jenseits des Immunsystems wird Kathepsin E mit neuronaler Degeneration und Gliazellaktivierung im Gehirn in Verbindung gebracht, was auf Rollen in neuroinflammatorischen und neurodegenerativen Prozessen hindeutet.
• Subzellulär lokalisiert sich Kathepsin E im Endosom, was mit seiner Funktion bei der Antigenprozessierung im endolysosomalen Weg übereinstimmt.
• Das Protein ist reichlich im Magen, in Clara-Zellen der Lunge und in aktivierten B-Lymphozyten exprimiert, mit niedrigeren Gehalten in Lymphknoten, Haut und Milz. Es wird nicht in ruhenden B-Lymphozyten nachgewiesen, was auf eine aktivierungsabhängige Expression hindeutet.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-Glykosylierung und die Bildung von zwei intramolekularen Disulfidbindungen, die entscheidend für die strukturelle Stabilität und enzymatische Aktivität sind.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Transkriptvarianten, die die funktionelle Diversität potenziell erhöhen. Das reife Protein hat eine Molekülmasse von etwa 43 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 132–244, die im Bereich des reifen Enzyms liegen. Diese Region kann über Spezies hinweg konserviert sein, was mit der beobachteten Kreuzreaktivität gegenüber Maus und Ratte übereinstimmt.
• Für die Western Blot (WB) beträgt die vorhergesagte Molekülmasse 43 kDa. Überprüfen Sie mit geeigneten Zell- oder Gewebelysaten; erwägen Sie die Verwendung von Extrakten aus aktivierten B-Lymphozyten oder Magen als Positivkontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) können aufgrund der subzellulären Lokalisation in Endosomen Antigen-Retrieval-Bedingungen erforderlich sein. Validieren Sie in Gewebeschnitten, von denen bekannt ist, dass sie Kathepsin E exprimieren, wie Magen oder Lunge.
• Für ELISA kann der Antikörper zur Capture oder Detektion verwendet werden; dennoch sollten optimale Arbeitsverdünnungen empirisch mit gereinigtem Protein oder rekombinanten Standards bestimmt werden.
• Da es sich um einen polyclonalen Antikörper handelt, sollte die Chargenkonsistenz überwacht werden. Wir empfehlen, jede neue Charge in der vorgesehenen Anwendung mit relevanten Kontrollen zu validieren.

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