Anti-Kathepsin E (CTSE) monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P14091

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Kathepsin E

• Kathepsin E ist eine Aspartylprotease, die zur Pepsinfamilie gehört und durch das CTSE-Gen kodiert wird; alternatives Splicing erzeugt mehrere Isoformen.
• Es spielt eine Rolle bei der Immunfunktion und ist wahrscheinlich an der Verarbeitung antigener Peptide während der MHC-Klasse-II-vermittelten Antigenpräsentation beteiligt.
• Im Thymus kann es zur aktivierungsinduzierten Lymphozytenverdepletion beitragen; im Gehirn wurde es mit neuronaler Degeneration und Aktivierung von Gliazellen in Verbindung gebracht.
• Das Protein lokalisiert hauptsächlich in Endosomen.
• Die Expression ist reichlich vorhanden im Magen, in Clara-Zellen der Lunge und in aktivierten B-Lymphozyten, mit geringeren Mengen in Lymphknoten, Haut und Milz; es fehlt in ruhenden B-Lymphozyten.
• Synthetisiert als inaktives Zymogen, durchläuft es eine autokatalytische Spaltung, um aktiv zu werden; das reife Enzym ist ein Glykoprotein mit Disulfidbrücken.
• Das Molekulargewicht des reifen Enzyms beträgt etwa 43 kDa (Vorläufer ~42,8 kDa).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 132-244 von menschlichem CTSE) zielt wahrscheinlich auf das reife Enzym ab; erwägen Sie die Verwendung des Antikörpers zum Nachweis sowohl von Vorläufer- als auch von aktiven Formen.
• Für Western Blot erwarten Sie unter reduzierenden Bedingungen eine Bande nahe 43 kDa; verwenden Sie positive Kontrollen wie Lysate aus Magen- oder Lungengewebe.
• Bei der Durchführung von ELISA validieren Sie die Bedingungen mit rekombinantem Protein oder Lysaten aus Geweben, die CTSE exprimieren.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht die Verwendung in Nagetiermodellen zur Untersuchung von Immunantworten oder Neurodegeneration.
• Da die Aktivität von Kathepsin E bei saurem pH-Wert optimal ist, können die Probenvorbereitung und die Wahl des Puffers den Nachweis beeinflussen; erwägen Sie die Optimierung von Lysepuffern.

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