Anti-Cathepsin B Monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P07858

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Cathepsin B

• Cathepsin B, codiert durch das CTSB-Gen, ist eine lysosomale Cysteinprotease, die zur Papain-Familie gehört. Alternativnamen sind APP-Sekretase (APPS) und Cathepsin B1.
• Es fungiert als Thiol-Protease, die das matrixextrazelluläre Phosphoglykoprotein MEPE spaltet und zum intrazellulären Proteinabbau und -umsatz beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:12220505
• Cathepsin B wurde mit der Tumorinvasion und Metastasierung in Verbindung gebracht, was seine Rolle bei der pathologischen Remodellierung der extrazellulären Matrix unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:3972105
• Aufgrund von Ähnlichkeiten beteiligt es sich an der Solubilisierung von vernetztem Thyreoglobulin im Inneren der Schilddrüsenfollikel.
• Subzellulär lokalisiert sich Cathepsin B in Lysosomen und Melanosomen. Es kann auch in den extrazellulären Raum sezerniert werden und assoziiert mit der apikalen Zellmembran.
• Die Gewebeexpression ist im Stratum spinosum der Epidermis prominent, mit einem schwächeren Nachweis im Stratum granulosum.
• Das Protein unterliegt einer proteolytischen Verarbeitung von einem Zymogen zu einem aktiven Enzym, weist Disulfidbrücken, Glykosylierung und Acetylierung auf, und seine dreidimensionale Struktur wurde bestimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 8-339) entspricht dem reifen Enzym, dem das Signalpeptid fehlt, was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl die Pro- als auch die aktiven Formen von Cathepsin B erkennen könnte. Eine Validierung im entsprechenden Probenystem wird empfohlen.
• Für das Western Blotting wird unter reduzierenden Bedingungen eine Bande in der Nähe von 38 kDa erwartet; zusätzliche Banden aufgrund der Verarbeitung (z. B. schwere und leichte Ketten des reifen Enzyms) können beobachtet werden.
• Das Format des kaninchen-monoklonalen Antikörpers sorgt typischerweise für hohe Spezifität und Chargen-zu-Chargen-Konsistenz. Bestätigen Sie die optimalen Arbeitsverdünnungen für Ihren spezifischen Versuchsaufbau.
• Für die Immunfluoreszenz sollten Sie Kookalisierungsstudien mit lysosomalen Markern (z. B. LAMP1) in Betracht ziehen und geeignete Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle verwenden.

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