Anti-CASR polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P41180

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CASR-Funktion und Lokalisierung

• Der extrazelluläre Kalzium-sensorische Rezeptor (CASR), auch bekannt als Nebenschilddrüsenzell-Kalzium-sensorischer Rezeptor 1 (PCaR1), wird durch das CASR-Gen (alternative Namen: GPRC2A, PCAR1) kodiert und gehört zur Familie der G-Protein-gekoppelten Rezeptoren. Alternatives Spleißen führt zu mehreren Isoformen.
• CASR fungiert als zentraler Regulator der systemischen Kalziumhomöostase, indem er Schwankungen der extrazellulären Kalziumkonzentration erfasst. In der Nebenschilddrüse aktiviert erhöhtes zirkulierendes Kalzium CASR, was zu einer verringerten Sekretion von Parathormon (PTH) führt. In der Niere moduliert es die renale tubuläre Kalziumrückresorption. Verwandte Referenzen: PMID:17555508 PMID:19789209 PMID:21566075
• Nach Ligandenbindung unterliegt CASR Konformationsänderungen, die die Signalübertragung über mehrere G-Protein-Subtypen auslösen. Es kann an G(q)/G(11) koppeln, um Phospholipase C-beta zu aktivieren (Erzeugung von DAG und IP3), und an G(i)/G(o), um Adenylatcyclase zu hemmen, wobei der spezifische Weg vom zellulären Kontext abhängt. Verwandte Referenzen: PMID:38632411 PMID:7759551
• Die volle Rezeptoraktivierung folgt einem Co-Agonisten-Mechanismus, bei dem aromatische Aminosäuren (z. B. Trp, Phe) zusammen mit zweiwertigen Kationen wie Kalzium oder Magnesium wirken. Verwandte Referenzen: PMID:27386547 PMID:27434672 PMID:32817431
• Über die Kalziumwahrnehmung hinaus wurde gezeigt, dass CASR über G(i)/G(o)-vermittelte Herunterregulierung von cAMP das NLRP3-Inflammasom aktiviert, was die NLRP3-Hemmung aufhebt. Verwandte Referenzen: PMID:32843625
• Der Rezeptor ist vorwiegend in der Zellmembran lokalisiert, was seiner Rolle bei der Erkennung extrazellulärer Signale entspricht.
• Die Gewebeexpression ist breit, mit Nachweis im Temporallappen, Frontallappen, Parietallappen, Hippocampus, Kleinhirn, Niere, Lunge, Leber, Herz, Skelettmuskel und Plazenta.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen und strukturelle Merkmale umfassen Disulfidbrücken, Glykosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation, die den Rezeptortransport und die Funktion beeinflussen können. Es enthält ein Signalpeptid und sieben für GPCRs charakteristische Transmembranhelices.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 180–536 von humanem CASR, einer Region innerhalb der großen extrazellulären Domäne, die für die Ligandenbindung entscheidend ist. Dieser Aufbau erzeugt wahrscheinlich Antikörper, die den nativen Rezeptor erkennen.
• Für Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von CASR etwa 121 kDa. Allerdings können umfangreiche Glykosylierung und andere Modifikationen zu einem höheren scheinbaren Molekulargewicht führen. Validieren Sie die Banden von Interesse mit geeigneten Kontrollen und erwägen Sie gegebenenfalls Entglykosylierungsexperimente.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Methoden erforderlich sein, um Epitope in formalinfixierten, paraffineingebetteten Geweben freizulegen. Optimieren Sie die Färbebedingungen mit positiven und negativen Kontrollgeweben.
• Von dem Antikörper wird erwartet, dass er mit CASR von Mensch, Maus und Ratte kreuzreagiert. Bestätigen Sie bei der Arbeit mit Tiermodellen die Reaktivität in der relevanten Spezies durch Testen einer Kontrollprobe.
• Für ELISA-Anwendungen kann die polyklonale Natur dieses Antikörpers eine hohe Sensitivität bieten. Er kann entweder als Capture- oder Detektionsantikörper verwendet werden, aber die Leistung sollte mit rekombinanten oder nativen Proteinstandards verifiziert werden.

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