Anti-Caspase-9 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55211

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Caspase-9-Funktion und Lokalisierung

• Caspase-9 ist eine Cysteinprotease der Caspase-Familie, die als Initiatorcaspase im intrinsischen apoptotischen Weg fungiert.
• Nach Bindung an Apaf-1 wird Caspase-9 aktiviert und spaltet anschließend Effektorcaspasen wie Caspase-3 und Caspase-7, um die Apoptose auszuführen.
• Caspase-9 fördert DNA-Schaden-induzierte Apoptose auf ABL1/c-Abl-abhängige Weise und spaltet Poly(ADP-Ribose)-Polymerase (PARP) proteolytisch.
• Caspase-9 spaltet BIRC6 nach der Hemmung der BIRC6-Caspase-Bindung durch DIABLO/SMAC. Verwandte Referenzen: PMID:36758105, PMID:36758106
• Eine alternativ gespleißte Isoform, Caspase-9S, fehlt katalytische Aktivität und wirkt als dominant-negativer Inhibitor des Vollängen-Enzyms.
• Ubiquitär exprimiert mit höchsten Leveln im Herzen (speziell in Myozyten), moderat in Leber, Skelettmuskel und Pankreas, und niedrig in anderen Geweben.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation, die seine Aktivität regulieren; als Zymogen synthetisiert, das proteolytische Prozessierung erfordert.
• Schlüsselwörter: Apoptose, Hydrolase, Protease, Thiolprotease, Phosphoprotein, Ubl-Konjugation, Zymogen, Alternatives Spleißen, 3D-Struktur.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 139-416 von humanem Caspase-9, was die große Untereinheit einschließt; der Antikörper kann sowohl die Vollängen-Proform (~46 kDa) als auch prozessierte Formen detektieren. Passende Molekulargewichtsmarker einbeziehen.
• Für Western Blot sollten Herz- oder Lebergewebelysate als positive Kontrollen in Betracht gezogen werden, angesichts der relativ hohen Expression in diesen Geweben.
• Bei der Immunhistochemie die Färbung in Herz- oder Leberschnitten validieren und die Antigen-Retrieval-Bedingungen für formalinfixierte, paraffineingebettete Gewebe optimieren.
• Für Immunfluoreszenz: Caspase-9 lokalisiert primär im Zytoplasma; Co-Färbung mit mitochondrialen Markern in Betracht ziehen, um apoptotische Aktivierung zu beurteilen.

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