Anti-Caspase-8 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, ELISA - O89110

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Caspase-8

• Caspase-8 ist eine Thiolprotease, die als molekularer Schalter für den programmierten Zelltod dient. Sie integriert Signale für Apoptose, Nekroptose und Pyroptose, um Gewebeschäden während der Entwicklung und im Erwachsenenalter zu verhindern. Zugehörige Referenzen: PMID:12065591 PMID:18455983 PMID:30361383
• Sie wirkt als Initiator-Caspase im extrinsischen Apoptoseweg, wird über FADD an Todesrezeptoren (FAS/CD95, TNFRSF1A) rekrutiert, um den todesinduzierenden Signalkomplex (DISC) zu bilden. Dort wird sie proteolytisch aktiviert und spaltet anschließend nachgeschaltete Effektor-Caspasen (CASP3, CASP6, CASP7) sowie BID, um die Freisetzung von Cytochrom C aus den Mitochondrien auszulösen. Zugehörige Referenzen: PMID:24813849 PMID:24813850 PMID:9654089 PMID:9727491 PMID:9727492
• Caspase-8 reguliert die Nekroptose negativ, indem sie RIPK1 an Asp-325 spaltet – ein entscheidender Vorgang, der die Autophosphorylierung von RIPK1 verhindert und den TNF-induzierten Zelltod sowie Entzündungen begrenzt. Zugehörige Referenzen: PMID:31511692
• Unter bestimmten Bedingungen (z. B. TAK1-Hemmung) kann Caspase-8 die Pyroptose initiieren, indem sie Gasdermin-C (GSDMC) und Gasdermin-D (GSDMD) spaltet und aktiviert. Dies führt zur Porenbildung und lytischem Zelltod. Zugehörige Referenzen: PMID:30361383 PMID:30381458
• Sie fungiert auch in der angeborenen Immunität, indem sie den negativen Regulator N4BP1 stromabwärts von TLR3 und TLR4 spaltet und inaktiviert, wodurch die Zytokinproduktion gefördert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:32971525
• Caspase-8 ist überwiegend zytoplasmatisch lokalisiert, kann aber auch im Kern vorkommen. Sie ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Gehalten in Milz, Thymus, Lunge, Leber und Niere, und geringeren Gehalten in Herz, Gehirn, Hoden und Skelettmuskel.
• Das Protein unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung und wird als inaktives Zymogen synthetisiert, das für die volle Aktivität Dimerisierung und Spaltung benötigt. Es gehört zur Peptidase-C14A-Familie cysteinabhängiger, aspartatgerichteter Proteasen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Reste 1-218 von Maus-Caspase-8 und schließt die N-terminale Prodomäne ein. Berücksichtigen Sie diese Region bei der Entwicklung von Detektionsstrategien, da der Antikörper sowohl die volle Länge als auch teilweise prozessierte Formen erkennen kann.
• Für den Western Blot ist eine Bande um 55 kDa zu erwarten, aber nach Induktion der Apoptose können kleinere Spaltfragmente auftreten. Validieren Sie die Spezifität mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen in Ihrem Zellsystem.
• Immunpräzipitation und Immunfluoreszenz/ICC sind mit diesem kaninchen monoklonalen Antikörper kompatibel. Optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte für intrazelluläre Targets und verwenden Sie Isotypkontrollen.
• Im ELISA kann dieser Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz im Sandwich-Format verwendet werden. Bestätigen Sie die Leistung mit rekombinanten Proteinstandards, um Linearität und Sensitivität zu bestimmen.

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