Anti-Caspase-3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42574

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Caspase-3-Funktion und Lokalisation

• Caspase-3 (CPP32, SCA-1) ist eine Thiolprotease und die primäre Effektor-Caspase in der Apoptose. Verwandte Referenzen: PMID:18723680, PMID:20566630, PMID:23650375
• Durch Initiator-Caspasen (CASP8, CASP9, CASP10) aktiviert, spaltet sie dann Schlüsselsubstrate wie PARP1 (PubMed:10497198, PubMed:16374543, PubMed:7596430), was zur Hemmung der DNA-Reparatur und zum apoptotischen Zelltod führt. Verwandte Referenzen: PMID:10497198, PMID:16374543, PMID:7596430
• Sie spaltet und aktiviert auch nachgeschaltete Effektor-Caspasen (CASP6, CASP7) und verstärkt die Caspase-Kaskade (PubMed:7596430). Verwandte Referenzen: PMID:7596430
• Neben der Apoptose ist Caspase-3 an der Pyroptose beteiligt, indem es Gasdermin-E (GSDME) spaltet (PubMed:35338844, PubMed:35446120), und reguliert Entzündungen durch Inaktivierung von Interleukin-18 (PubMed:37993714, PubMed:9334240). Verwandte Referenzen: PMID:35338844, PMID:35446120, PMID:37993714, PMID:9334240
• Sie vermittelt die Exposition von Phosphatidylserin auf apoptotischen Zellen durch Spaltung von XKR-Scramblasen (PubMed:23845944, PubMed:33725486) und trägt zu Zelladhäsionsveränderungen bei, indem sie Desmosomenproteine spaltet (PubMed:17559062). Verwandte Referenzen: PMID:23845944, PMID:33725486, PMID:17559062
• Subzellulär ist Caspase-3 überwiegend zytoplasmatisch lokalisiert, was mit ihrer Effektorrolle übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung, und sie wird als inaktives Zymogen synthetisiert, das zur Aktivierung gespalten werden muss.
• Hoch exprimiert in Lunge, Milz, Herz, Leber, Niere und Immunzellen, mit geringer Expression im Hoden, was ihre Schlüsselrolle in der Gewebehomöostase und Immunfunktion widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 6-105) des humanen Caspase-3-Vollständigproteins (32 kDa). Im WB können je nach Apoptoseinduktion sowohl die Pro-Form (~32 kDa) als auch das gespaltene große Fragment (~17 kDa) detektiert werden.
• Für IHC-P sollten Sie die Optimierung der Antigen-Retrieval-Bedingungen (z.B. Citratpuffer pH 6.0) gemäß den Empfehlungen für Ihren Gewebetyp und Ihr Fixierungsprotokoll in Betracht ziehen.
• Von diesem polyklonalen Antikörper wird berichtet, dass er aufgrund von Sequenzhomologie mit Maus- und Ratten-Caspase-3 kreuzreagiert; wir empfehlen jedoch, die Spezifität in Ihrem eigenen experimentellen System zu validieren.
• Für ELISA verwenden Sie ein Standard-Sandwich-Format und bestätigen Sie die optimale Antikörperpaarung und Nachweisempfindlichkeit mit rekombinanter Caspase-3 als Referenz.

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