Anti-Caspase-3 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42574

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Caspase-3-Funktion und Lokalisierung

• Caspase-3 ist eine Thiolprotease, die als wichtige Effektor-Caspase in der Exekutionsphase der Apoptose wirkt. Nach Aktivierung durch Initiator-Caspasen (CASP8, CASP9 und/oder CASP10) vermittelt sie Apoptose durch die katalytische Spaltung zahlreicher Proteinsubstrate. Verwandte Referenzen: PMID:18723680 PMID:20566630 PMID:23650375
• Ein charakteristisches apoptotisches Ereignis ist die proteolytische Spaltung von Poly(ADP-Ribose)-Polymerase PARP1 an der Bindung Asp216-Gly217. Caspase-3 spaltet und aktiviert auch nachgeschaltete Caspasen wie CASP6, CASP7 und CASP9 und inaktiviert Interleukin-18 (IL18). Verwandte Referenzen: PMID:10497198 PMID:16374543 PMID:7596430 PMID:37993714 PMID:9334240
• Über die Apoptose hinaus ist Caspase-3 an der Pyroptose beteiligt, indem sie die Spaltung und Aktivierung von Gasdermin-E (GSDME) vermittelt, was sie mit entzündlichen Zelltodwegen verbindet. Verwandte Referenzen: PMID:35338844 PMID:35446120
• Caspase-3 trägt zu nicht-apoptotischen Rollen bei, einschließlich Axon-Beschneidung während der Gehirnentwicklung, Regulation der Zelladhäsion über RET und Spaltung von Desmosomen-Proteinen (z.B. DSG2, JUP) sowie Spaltung von Huntingtin. Verwandte Referenzen: PMID:8696339 PMID:21357690 PMID:17559062
• Unter oxidativem Stress spaltet und hemmt Caspase-3 die Serin/Threonin-Proteinkinase AKT1, und während einer Virusinfektion spaltet sie antivirale Proteine wie CGAS, IRF3 und MAVS, um eine Überproduktion von Zytokinen zu verhindern. Verwandte Referenzen: PMID:23152800 PMID:30878284
• Das Protein lokalisiert überwiegend im Zytoplasma und wird in hohen Konzentrationen in Lunge, Milz, Herz, Leber und Niere exprimiert, mit moderaten Konzentrationen im Gehirn und Skelettmuskel und niedrigen Konzentrationen im Hoden. Es ist am häufigsten in Zellen des Immunsystems vorhanden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 55–160 von humanem Caspase-3 und umfasst einen Teil der Pro-Domäne und der großen Untereinheit; beachten Sie, dass dieser Antikörper sowohl die inaktive Pro-Form als auch die gespaltene aktive Form erkennen kann.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 32 kDa, aber Spaltfragmente (z.B. ~17 kDa und ~12 kDa) können je nach Aktivierungszustand und Probenvorbereitung auftreten.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) validieren Sie die Färbung in bekannten positiven Geweben (z.B. Milz, Thymus) und schließen geeignete Kontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Angesichts der hohen Sequenzidentität zwischen Mensch, Maus und Ratte wird Kreuzreaktivität erwartet; die optimale Verdünnung und Inkubationsbedingungen sollten jedoch empirisch für jede Spezies und Anwendung bestimmt werden.
• Lagern Sie wie empfohlen (Versand im Eisbeutel) und vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Tau-Zyklen, um die Stabilität und Leistung des Antikörpers zu erhalten.

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