Anti-Caspase-3 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P42574

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Caspase-3

• Caspase-3 (EC 3.4.22.56), auch bekannt als Apopain, CPP32, Yama und SCA-1, ist eine wichtige Ausführungs-Caspase im apoptotischen Signalweg. Zugehörige Referenzen: PMID:18723680, PMID:20566630, PMID:23650375
• Das Enzym wird als inaktives Zymogen (Pro-Caspase-3) synthetisiert, das durch proteolytische Prozessierung durch Initiator-Caspasen (CASP8, CASP9, CASP10) in die aktiven p17- und p12-Untereinheiten gespalten wird. Zugehörige Referenzen: PMID:7596430, PMID:18723680
• Nach der Aktivierung spaltet Caspase-3 zahlreiche zelluläre Substrate, darunter PARP1, SREBPs und Caspase-6/-7/-9, um die Apoptose auszuführen. Zugehörige Referenzen: PMID:10497198, PMID:16374543, PMID:7596430
• Über die Apoptose hinaus vermittelt Caspase-3 auch die Pyroptose durch Spaltung von Gasdermin-E (GSDME) und hemmt die Produktion von Typ-I-Interferon während einer Virusinfektion, indem es auf CGAS, IRF3 und MAVS abzielt. Zugehörige Referenzen: PMID:35338844, PMID:35446120, PMID:30878284
• Das Protein lokalisiert primär im Zytoplasma und wird in Lunge, Milz, Herz, Leber, Niere und Immunzellen stark exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität regulieren.
• Caspase-3 spielt auch eine Rolle beim Axon-Pruning, der Zelladhäsion durch RET- und DSG2-Spaltung sowie der Phosphatidylserin-Exposition durch Scramblase-Spaltung. Zugehörige Referenzen: PMID:21357690, PMID:17559062, PMID:23845944, PMID:33725486

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 29–175, was die große p17-Untereinheit von Caspase-3 abdeckt. Im Western Blot kann der Antikörper sowohl Pro-Caspase-3 (ca. 32 kDa) als auch die gespaltene aktive große Untereinheit (ca. 17–20 kDa) erkennen; geeignete Apoptose-Induktionskontrollen (z. B. Staurosporin-Behandlung) werden empfohlen, um den Nachweis prozessierter Formen zu verifizieren.
• Die KO-Validierung stellt eine hohe Zielspezifität sicher; erwägen Sie die Einbeziehung von Knockout-Zelllinien oder -Geweben als Negativkontrollen in Ihren Experimenten.
• Validieren Sie für ELISA das Antikörperpaar unter den vorgesehenen Assay-Bedingungen und bestätigen Sie die Sensitivität mit rekombinantem Caspase-3-Protein.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus ermöglicht vergleichende Studien zwischen humanen und Maus-Apoptose-Modellen.

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