Monoklonaler Anti-Caspase-3 Antikörper für WB, ELISA – P42574

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Caspase-3

• Caspase-3 (auch bekannt als Apopain, CPP32, Yama und SCA-1) ist eine Thiolprotease, die als wichtigste Effektor-Caspase in der apoptotischen Kaskade fungiert.
• Es vermittelt die Effektorphase der Apoptose durch Spaltung eines breiten Spektrums zellulärer Substrate – einschließlich der charakteristischen Spaltung der Poly(ADP-Ribose)-Polymerase PARP1 an Asp216-Gly217 – und aktiviert die nachgeschalteten Caspasen -6, -7 und -9, um die proteolytische Kaskade zu verstärken. Verwandte Referenzen: PMID:18723680 PMID:20566630 PMID:23650375 PMID:10497198 PMID:16374543 PMID:7596430
• Spaltet Interleukin-18 (IL18), Huntingtin, RET, desmosomale Cadherine DSG2 und JUP sowie AKT1 und inaktiviert angeborene antivirale Immunproteine (CGAS, IRF3, MAVS) während der virusinduzierten Apoptose; es spaltet außerdem Gasdermin-E (GSDME), um die Pyroptose auszulösen. Verwandte Referenzen: PMID:37993714 PMID:9334240 PMID:8696339 PMID:21357690 PMID:17559062 PMID:23152800 PMID:30878284 PMID:35338844 PMID:35446120
• Fördert die Exposition von Phosphatidylserin auf der Oberfläche apoptotischer Zellen durch Spaltung der Scramblasen XKR4, XKR8 und XKR9 und sichert den Fortgang der Apoptose durch Spaltung von BIRC6 nach DIABLO/SMAC-vermittelter Hemmung. Verwandte Referenzen: PMID:23845944 PMID:33725486 PMID:36758104 PMID:36758106
• Lokalisiert überwiegend im Zytoplasma.
• Wird stark exprimiert in Lunge, Milz, Herz, Leber und Niere, mit mäßigen Gehalten in Gehirn und Skelettmuskel und geringen Gehalten im Hoden; die Expression ist besonders hoch in Zellen des Immunsystems.
• Unterliegt multiplen posttranslationalen Modifikationen, darunter Acetylierung, Phosphorylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität regulieren.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Beim Western Blot kann der Antikörper sowohl die volllängige Pro-Caspase-3 (~32 kDa) als auch das gespaltene große Fragment (~17-19 kDa) nachweisen, da die Immunogensequenz (AS 55-160) innerhalb der großen p17-Untereinheit liegt. Als Positivkontrolle eignen sich Lysate apoptotischer Zellen (z. B. Jurkat, behandelt mit Staurosporin).
• Bei ELISA-Anwendungen kann das rekombinante Fusionsprotein, das der Immunogenregion entspricht, als Beschichtungsantigen verwendet werden. Validieren Sie die Antikörperleistung mit geeigneten Standards und Probenmatrizen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit murinem Caspase-3, sodass er für Proben aus Maus verwendet werden kann. Eine Titrierung und Optimierung unter Ihren spezifischen Versuchsbedingungen wird empfohlen.

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