Anti-Caspase-1 polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P29466

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Caspase-1-Funktion und Lokalisierung

• Caspase-1, auch bekannt als Interleukin-1-beta-Convertase (ICE) oder p45, ist eine Thiolprotease und ein Schlüsselmitglied der Cystein-Asparaginsäure-Protease (Caspase)-Familie.
• Nach Aktivierung innerhalb des Inflammasom-Komplexes spaltet es pro-IL-1β und pro-IL-18 proteolytisch in ihre aktiven reifen Formen und initiiert so pro-inflammatorische Reaktionen. Verwandte Referenzen: PMID:15326478 PMID:15498465 PMID:1574116
• Es spaltet Gasdermin-D (GSDMD), um den pyroptotischen Zelltod auszulösen, wobei die Substraterkennung von einer Exosite-Schnittstelle abhängt und nicht von einer strengen Konsensus-Spaltstelle. Verwandte Referenzen: PMID:26375003 PMID:32051255 PMID:32109412 PMID:32553275
• Zusätzliche Substrate umfassen CASP7, das gespalten wird, um die Plasmamembranreparatur während bakterieller Infektionen zu fördern; CGAS, das während DNA-Virusinfektionen inaktiviert wird; und SPHK2, das in apoptotischen Zellen freigesetzt wird. Verwandte Referenzen: PMID:22464733 PMID:28314590 PMID:20197547
• Es ist primär im Zytoplasma lokalisiert und assoziiert mit der Zellmembran.
• Caspase-1 ist hoch exprimiert in Milz und Lunge, mit niedrigeren Spiegeln in Leber, Herz, Dünndarm, Dickdarm, Thymus, Prostata, Skelettmuskel, peripheren Blutleukozyten, Niere und Hoden; es fehlt im Gehirn.
• Das Protein unterliegt einer autoproteolytischen Reifung von einem 45 kDa Zymogen und ist Phosphorylierung, Isopeptidbindungsbildung und Ubiquitin-ähnlicher Konjugation unterworfen. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer Region innerhalb der p20-Untereinheit von humanem Pro-Caspase-1, was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl das vollständige 45 kDa Proenzym als auch seine prozessierten Fragmente erkennen kann. Beim Western Blot sollte in Betracht gezogen werden, Lysate von Zellen zu untersuchen, die mit Inflammasom-Aktivatoren (z.B. LPS/ATP) behandelt wurden, um die Caspase-1-Aktivierung zu beobachten.
• Für die Immunfluoreszenz (IF-P) validieren Sie den Antikörper in Zelllinien oder Geweben mit bekannter CASP1-Expression (z.B. THP-1-Makrophagen, Milz) und optimieren Sie die Permeabilisierung, um zytoplasmatische und membrangebundene Pools zu detektieren.
• Verwenden Sie in ELISA den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz für die Caspase-1-Quantifizierung; bestätigen Sie die Reaktivität gegen rekombinantes humanes CASP1 und die Kreuzreaktivität mit Maus-/Ratten-Homologen in der relevanten Probenmatrix.

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