Monoklonaler Anti-Caspase-1-Antikörper für WB, ELISA – P29466

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Caspase-1

• Caspase-1, auch als Interleukin-1-Beta-Konvertase (ICE/p45/IL1BC) bezeichnet, ist ein Mitglied der Caspase-Familie der Cystein-Aspartat-Proteasen (Thiolproteasen), die eine zentrale Rolle bei Entzündungsreaktionen und dem programmierten Zelltod spielt.
• Sie ist für die Verarbeitung und Sekretion der proinflammatorischen Zytokine Interleukin-1-Beta (IL-1β) und Interleukin-18 (IL-18) essenziell, indem sie deren Vorläuferformen in biologisch aktive reife Peptide spaltet.
  Verwandte Referenzen: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• Caspase-1 initiiert Pyroptose, eine lytische Form des programmierten Zelltods, durch die Spaltung von Gasdermin-D (GSDMD). Dabei erfolgt die Substraterkennung über eine Exosite-Schnittstelle, die sich von der kanonischen Spaltstelle unterscheidet.
  Verwandte Referenzen: PMID:26375003, PMID:32051255, PMID:32109412, PMID:32553275
• Neben IL-1β/IL-18 und GSDMD spaltet Caspase-1 auch weitere Substrate, darunter Caspase-7 (CASP7) während einer bakteriellen Infektion zur Förderung der Membranreparatur, die zyklische GMP-AMP-Synthase (CGAS) zur Regulierung der antiviralen Immunität sowie die Sphingosinkinase 2 (SPHK2) in apoptotischen Zellen.
  Verwandte Referenzen: PMID:22464733, PMID:28314590, PMID:20197547
• Sie ist hauptsächlich im Zytoplasma lokalisiert, kann aber auch mit der Zellmembran assoziieren.
• Die Gewebeexpression ist in Milz und Lunge am höchsten; niedrigere Spiegel wurden in Leber, Herz, Dünndarm, Kolon, Thymus, Prostata, Skelettmuskulatur, peripheren Blutleukozyten, Niere und Hoden nachgewiesen. Im Gehirn wird sie nicht exprimiert.
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen, die bei der Apoptose inaktiv sind. Zudem unterliegt das Protein posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitin-ähnlicher Konjugation, sowie der Prozessierung vom Zymogen zum aktiven Enzym.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 120–297 der humanen Caspase-1 (NP_150634.1) und liegt innerhalb der p20-Untereinheit des prozessierten Enzyms. Diese Region kann Antikörper hervorbringen, die sowohl die Proform als auch gespaltene Fragmente erkennen. Anwender sollten dies jedoch in ihrer spezifischen Probenmatrix validieren.
• Im Western Blot wandert das Caspase-1-Proenzym voller Länge bei ungefähr 45 kDa. Je nach Aktivierungszustand können zusätzliche Banden auftreten, die den prozessierten p20- und p10-Untereinheiten entsprechen. Optimieren Sie daher die Bedingungen für Beladung und Detektion entsprechend.
• Bei ELISA-Anwendungen sollte das rekombinante Immunogen als Referenzstandard oder Beschichtungsantigen in Betracht gezogen werden. Wenn eine hohe Spezifität erforderlich ist, sollte außerdem die Kreuzreaktivität mit verwandten Mitgliedern der Caspase-Familie überprüft werden.
• Die Kreuzreaktivität wurde für den Menschen bestätigt. Bei Experimenten mit anderen Spezies sollte eine unabhängige Validierung durchgeführt werden, da die Sequenzhomologie variiert.

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