Anti-CARD8 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9Y2G2

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CARD8-Funktion und Lokalisation

• CARD8 (Caspase-Rekrutierungsdomänen-enthaltendes Protein 8), auch bekannt als CARDINAL, TUCAN, NDPP1, DAKAR, DACAR oder NDPP, ist ein Mitglied der CARD-enthaltenden Proteinfamilie.
• CARD8 wirkt als Inflammasom-Sensor, erkennt Pathogen-/Schadenssignale wie HIV-1-Proteaseaktivität oder den Val-boroPro-Inhibitor und vermittelt die Inflammasom-Aktivierung, die zur Pyroptose von CD4+ T-Zellen und Makrophagen führt.
  Verwandte Referenzen: PMID:11408476, PMID:11821383, PMID:15030775, PMID:32840892, PMID:33542150, PMID:36357533
• Das Voll-Längen-Protein unterliegt einer autoproteolytischen Spaltung innerhalb der FIIND-Domäne, wodurch N-terminale und C-terminale Fragmente entstehen, die in Abwesenheit von Stimuli nicht-kovalent assoziiert bleiben.
• Bei Pathogenerkennung wird das N-terminale Fragment ubiquitinyliert und durch das Proteasom abgebaut, wodurch das C-terminale Fragment freigesetzt wird, um das CARD8-Inflammasom zu bilden, das direkt Pro-Caspase-1 rekrutiert und deren Aktivierung fördert, was zur GSDMD-Spaltung und Pyroptose führt.
  Verwandte Referenzen: PMID:32558991, PMID:32051255, PMID:32840892, PMID:33053349, PMID:34019797
• Zusätzlich zu seiner Inflammasom-Rolle fungiert CARD8 auch als negativer Regulator der NF-kappa-B-Aktivierung und des NLRP3-Inflammasoms.
  Verwandte Referenzen: PMID:11551959, PMID:12067710, PMID:24517500
• CARD8 ist im Zytoplasma, Zellkern und in assemblierten Inflammasom-Komplexen lokalisiert.
• CARD8 ist hoch exprimiert in Lunge, Eierstock, Hoden und Plazenta, mit geringerer Expression in Herz, Niere und Leber; es wird auch in Milz, Lymphknoten und Knochenmark exprimiert.
  Verwandte Referenzen: PMID:11551959, PMID:11821383
• CARD8 spielt eine Rolle in der Wirtsabwehr gegen HIV-1: Es erkennt HIV-1-Proteaseaktivität, was zur Clearance von latentem Virus nach viraler Reaktivierung führt, während HIV-1 die Erkennung umgehen kann, indem es die Protease-Inaktivität in infizierten Zellen aufrechterhält.
  Verwandte Referenzen: PMID:33542150

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen 1-200 Aminosäure-Region, daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich das Voll-Längen-CARD8 und sein N-terminales Fragment. Ziehen Sie in Betracht, die Spezifität durch Analyse der autoproteolytischen Spaltungsprodukte in Zelllysaten zu überprüfen.
• Für Western Blot verwenden Sie humane Zelllinien oder Gewebe mit bestätigter CARD8-Expression (z.B. THP-1-Makrophagen, Lungen- oder Eierstocklysate). Das vorhergesagte Voll-Längen-Protein ist ~61 kDa, aber Spaltungsfragmente können ebenfalls detektiert werden. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen ein.
• Für ELISA kann der Antikörper in Sandwich- oder indirekten Formaten eingesetzt werden. Kombinieren Sie ihn mit einem Detektor-Antikörper gegen eine andere CARD8-Epitopregion, um die Assay-Spezifität sicherzustellen.
• Da dieser polyklonale Antikörper für humanes CARD8 validiert ist, sollte die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies experimentell getestet werden. Ziehen Sie die Verwendung von Inflammasom-Aktivatoren (z.B. Val-boroPro) oder HIV-1-Protease-Inhibitoren in relevanten Infektionsmodellen in Betracht, um die CARD8-Dynamik zu untersuchen.

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