Anti-Carbonic Anhydrase 9 (CA9/G250) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB - Q16790

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Carbonic Anhydrase 9

• Carbonic anhydrase 9 (CA9/CA-IX) ist ein Mitglied der alpha-Carbonic-Anhydrase-Familie und kodiert für ein transmembranes Zink-Metalloenzym.
• Sie katalysiert die reversible Hydratation von Kohlendioxid zu Bicarbonat und Protonen und spielt eine entscheidende Rolle bei der pH-Regulation.
• CA9 wird hauptsächlich in Karzinom-Zelllinien exprimiert, mit begrenzter Expression in normalem Gewebe, am häufigsten in Epithelzellen der Magenschleimhaut.
• Sie lokalisiert an der Zellmembran, der Mikrovillus-Membran, dem Zellkern und dem Nukleolus.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Glykosylierung und enthält Disulfidbrücken.
• Wichtige strukturelle Merkmale: Signalpeptid, Transmembranhelix und Zink-Bindungsstelle, die für die katalytische Aktivität essentiell ist.
• Das Molekulargewicht beträgt etwa 49,7 kDa (UniProt), wird aber aufgrund von Glykosylierung oft bei 50 kDa beobachtet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 52-151); erwägen Sie, den Antikörper unter nicht-reduzierenden Bedingungen zu testen, um die native Konformation zu erkennen.
• Für den Western Blot: Validieren Sie mit Lysaten von Hypoxie-behandelten humanen Karzinomzellen (z.B. HT-29, HeLa); erwarten Sie ein Band bei etwa 50 kDa.
• Für IHC-P kann eine Antigen-Demaskierung und Titration erforderlich sein, um Membran- und/oder Kernfärbung in Tumorproben nachzuweisen.
• Für IF/ICC: Schließen Sie Permeabilisierungsschritte ein, um intrazelluläre Pools zu detektieren und mit Membranmarkern zu co-färben.
• Die ELISA-Leistung kann mit rekombinantem CA9-Protein bewertet werden; optimieren Sie die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen.

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