Anti-Carbonic-Anhydrase-9-(CA9/G250)-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – Q16790

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Carbonic Anhydrase 9 (CA9/G250)

• CA9, auch als CAIX, MN oder G250 bekannt, ist eine transmembranäre Carbonic Anhydrase, die die reversible Hydratation von Kohlendioxid zu Bicarbonat und Protonen katalysiert und eine wichtige Rolle bei der pH-Homöostase spielt.
• Das Protein ist in der Zellmembran lokalisiert, insbesondere in der Mikrovilli-Membran, und kommt außerdem im Zellkern und im Nukleolus vor.
• In normalem Gewebe ist die Expression stark eingeschränkt, wobei die höchsten Konzentrationen in Epithelzellen der Magenschleimhaut vorkommen. In Karzinomzelllinien wird es jedoch häufig überexprimiert, wodurch es zu einem nützlichen tumorassoziierten Marker wird.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören N-verknüpfte Glykosylierung, Phosphorylierung und eine Disulfidbrücke, die Stabilität und Funktion beeinflussen können.
• Das Enzym benötigt Zink als Kofaktor für seine katalytische Aktivität, was charakteristisch für die Alpha-Carbonic-Anhydrasen ist.
• Alternative Bezeichnungen wie Carbonatdehydratase IX, Nierenzellkarzinom-assoziiertes Antigen G250 und p54/58N spiegeln seine Funktionen in Physiologie und Onkologie wider.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 52–151 der extrazellulären Domäne. Für den Western Blot sollten unter reduzierenden Bedingungen Ganzzelllysate oder Membranfraktionen verwendet werden, um Disulfidbrücken zu spalten.
• Für ELISA-Anwendungen kann eine Titration erforderlich sein, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren. Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproben sollte mithilfe geeigneter Kontrollen validiert werden.
• Aufgrund der eingeschränkten Expression in normalem Gewebe kann die Detektion in Gewebelysaten von Anreicherungsschritten oder der Verwendung positiver Kontroll-Karzinomzelllinien profitieren.
• Für Anwendungen wie IHC oder IF wird eine Optimierung empfohlen, da native Konformationen das von diesem polyklonalen Antikörper erkannte Epitop möglicherweise verdecken können.

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