Anti-Carbonic Anhydrase 9 (CA9/G250) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q16790

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Carbonic Anhydrase 9 (CA9/G250)

• Carbonic Anhydrase 9 (CA9, auch bekannt als CA-IX, CAIX, MN, G250) ist ein Mitglied der Carbonic-Anhydrase-Familie, das die reversible Hydratisierung von Kohlendioxid zu Bicarbonat und Protonen katalysiert und eine Schlüsselrolle bei der pH-Regulation spielt.
• Es ist ein Transmembranenzym, das vorwiegend an der Zellmembran und der Mikrovillusmembran lokalisiert ist, wurde aber auch im Zellkern und im Nukleolus nachgewiesen.
• Die Expression ist in normalen Geweben stark eingeschränkt, wobei die stärkste Expression in den Epithelzellen der Magenschleimhaut gefunden wird; sie ist jedoch in vielen Karzinomzelllinien stark hochreguliert, was sie zu einem bekannten tumorassoziierten Antigen macht.
• CA9 ist an die Anpassung von Tumorzellen an hypoxische und saure Mikroumgebungen beteiligt und erleichtert das Überleben und die Invasion von Krebszellen.
• Das Protein enthält eine zinkbindende katalytische Domäne und unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Disulfidbrückenbildung, Glykosylierung und Phosphorylierung; seine reife Form ist auch einer proteolytischen Abspaltung unterworfen.
• Laut UniProt beträgt das berechnete Molekulargewicht ca. 49,7 kDa, und es wandert in der SDS-PAGE bei etwa 50 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer internen Peptidsequenz (Aminosäuren 200-300) von humanem CA9; berücksichtigen Sie bei der Planung von Experimenten und der Auswahl von Permeabilisierungs- oder Antigen-Retrieval-Protokollen die Epitop-Lokalisation (intrazelluläre Domäne).
• Für Western Blotting wird eine Hauptbande um 50 kDa erwartet; validieren Sie den Antikörper in Zelllinien mit bekannten CA9-Expressionsniveaus (z. B. Karzinomzelllinien) und optimieren Sie die Beladungs- und Blockierungsbedingungen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) führen Sie eine Antigen-Retrieval durch hitzevermittelte oder enzymatische Methoden durch und titrieren Sie den Antikörper, um den Hintergrund zu minimieren; fügen Sie geeignete positive und negative Gewebekontrollen hinzu.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper potenziell als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; erwägen Sie eine Kombination mit anderen CA9-spezifischen Antikörpern und validieren Sie diese in der relevanten Probenmatrix.
• Verifizieren Sie immer die Spezifität unter Verwendung von Knockout- oder Knockdown-Modellen, falls verfügbar, und berücksichtigen Sie die Kreuzreaktivität mit anderen Mitgliedern der Carbonic-Anhydrase-Familie.

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