Anti-CAND1-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q86VP6

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CAND1

• Proteinidentität: Das Cullin-assoziierte NEDD8-dissoziierte Protein 1 (CAND1), auch bekannt als TIP120, TIP120A oder p120 CAND1, wird beim Menschen vom CAND1-Gen (GeneID: 55832) kodiert.
• Zentrale Funktion: Wirkt als wichtiger Assemblierungsfaktor für SCF-E3-Ubiquitin-Ligasekomplexe (SKP1-CUL1-F-Box-Protein-Komplexe), fördert den Austausch der F-Box-Untereinheiten zur Substraterkennung und reguliert dadurch das zelluläre Repertoire der SCF-Komplexe.
• Austauschmechanismus: Fungiert als Austauschfaktor für F-Box-Proteine; seine Aktivität ist an Neddylierungszyklen gekoppelt. Im deneddylierter Zustand bindet CAND1 an CUL1-RBX1, erhöht die Dissoziation von SCF und erleichtert den Austausch von F-Box-Proteinen.
• Übergeordnete Funktion: Spielt wahrscheinlich eine ähnliche Rolle in anderen Cullin-RING-E3-Ubiquitin-Ligasekomplexen.
• Subzelluläre Lokalisierung: Befindet sich sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern.
• Posttranslationale Modifikationen: Unterliegt, wie durch Proteomikdaten angezeigt, einer Acetylierung und Phosphorylierung.
• Strukturelle Merkmale: Enthält sich wiederholende Sequenzmotive (UniProt-Schlüsselwort: Repeat), möglicherweise HEAT-Repeats, die Protein-Protein-Interaktionen vermitteln können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Western Blotting (WB): Erwarten Sie eine Bande bei etwa 136 kDa, die dem vollständigen CAND1 entspricht. Verwenden Sie geeignete Proteinmarker und überprüfen Sie die Spezifität mit Positivkontrollen (z. B. Zelllysaten von Mensch, Maus oder Ratte). Optimieren Sie die Blockierung und die Antikörperverdünnung für Ihr System.
• Immunhistochemie (IHC-P): Für in Paraffin eingebettete Gewebe sollten Sie standardmäßige Methoden zur Antigen-Retrieval in Betracht ziehen (z. B. hitzeinduziertes Epitop-Retrieval in Citratpuffer, pH 6,0). Validieren Sie die Spezifität der Färbung mit Negativkontrollen und bestätigen Sie die zytoplasmatische/nukleäre Lokalisierung.
• ELISA: Kann in standardmäßigen ELISA-Protokollen verwendet werden. Für Sandwich-Assays sollte eine Kombination mit einem Detektionsantikörper gegen ein anderes Epitop in Betracht gezogen werden. Validieren Sie Linearität und Sensitivität mithilfe von rekombinantem CAND1-Protein.
• Kreuzreaktivität: Aufgrund der Homologie der Immunogensequenz wird eine Kreuzreaktivität mit CAND1 von Maus und Ratte vorhergesagt. Eine unabhängige Validierung in den Zielarten wird jedoch empfohlen.
• Allgemein: Als polyklonaler Antikörper kann die Chargenkonsistenz variieren. Erwägen Sie daher, interne Referenzstandards in Ihre Assays einzubeziehen.

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