Anti-CaMKI Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB und ELISA - Q14012

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CaMKI/CaMKI-alpha-Funktion und Lokalisierung

• Die Kalzium/Calmodulin-abhängige Proteinkinase Typ 1 (CaMKI, auch bekannt als CaM-Kinase I alpha) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die zur CaMK-Familie gehört. Sie fungiert downstream von CaMKK in der kalziumausgelösten Signalkaskade.
• CaMKI ist ein Schlüsselregulator der neuronalen Entwicklung und Funktion. Es fördert das axonale Wachstum, die Motilität des Wachstumskegels, das dendritische Wachstum und die Bildung von Dornen/Synapsen in hippocampalen Neuronen. Es ist essentiell für die langzeitige Potenzierung (LTP) und die ERK2-abhängige translationsaktivierung an Synapsen.
• Über das Nervensystem hinaus reguliert CaMKI vielfältige Prozesse, einschließlich des Zellzyklusfortschritts (G1/S-Übergang via Cyclin-D1/CDK4), der Muskelzelldifferenzierung (via HDAC5-Phosphorylierung und nukleärem Export) und der Hormonproduktion (Regulation der Aldosteronsynthase in der Nebennierenrinde).
• Die Kinase phosphoryliert zahlreiche Substrate wie CREB1, ATF1, CFTR, MYL9, SYN1, EIF4G3, ARHGEF7, MARK2 und NUMB und steuert damit Transkription, Endozytose und Zytoskelettdynamik.
• CaMKI ist sowohl im Zytoplasma als auch im Kern lokalisiert, was seinen Rollen in der Signaltransduktion und der transkriptionellen Regulation entspricht.
• Das Protein ist in verschiedenen Geweben weit verbreitet exprimiert, mit einer bemerkenswerten Expression in der Nebennierenrinde.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung zur Aktivierung und Ubiquitinierung; es ist ein allosterisches Enzym, das in einer Kalzium-abhängigen Weise Calmodulin bindet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (aa 1-100), das über Arten hinweg konserviert sein könnte und wahrscheinlich die native Konformation von CaMKI detektiert. Erwägen Sie eine Voradsorption mit dem Immunisierungspeptid, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für Western Blots validieren Sie den Antikörper in Lysaten aus humanen, murinen oder rattengewebigen Zelllinien, in denen CaMKI exprimiert wird (z. B. Gehirn, Nebenniere). Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ca. 41 kDa; sorgen Sie für optimale Gelelektrophorese- und Transferbedingungen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden. Führen Sie eine Kreuztitrierung mit dem Antigen durch, um die optimalen Arbeitskonzentrationen zu ermitteln. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu.
• Da CaMKI durch Kalzium/Calmodulin aktiviert wird, kann die Stimulation von Zellen mit Mitteln, die den intrazellulären Ca2+-Spiegel erhöhen, die Detektion in funktionellen Assays verbessern.

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