Anti-Calreticulin Kaninchen monoklonaler Antikörper (KO-validiert) für WB, IHC-P, ELISA – P27797

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Calreticulin-Funktion und Lokalisierung

• Calreticulin, auch bekannt als CRP55, calregulin, ERp60, HACBP und grp60, wird durch das CALR-Gen kodiert.
• Es fungiert als Calcium-bindendes Chaperon, das die Faltung, oligomere Assemblierung und Qualitätskontrolle neu synthetisierter Glykoproteine im endoplasmatischen Retikulum über den Calreticulin/Calnexin-Zyklus fördert.
• Als ER-residentes Lektin interagiert es vorübergehend mit fast allen monoglucosylierten Glykoproteinen, die im ER synthetisiert werden. Verwandte Referenzen: PMID:7876246
• Calreticulin vermittelt auch den Kernexport des Glucocorticoidrezeptors (NR3C1) durch Bindung an dessen DNA-Bindungsdomäne. Verwandte Referenzen: PMID:11149926
• Subzellulär ist es hauptsächlich im ER-Lumen zu finden, kommt aber auch im Zytosol, auf der Zelloberfläche und in der extrazellulären Matrix sowie in zytoplasmatischen Vesikeln wie kortikalen und zytolytischen Granula vor.
• Das Protein unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Disulfidbindungsbildung, Acetylierung, Hydroxylierung und N-verknüpfter Glykosylierung, die zu seiner strukturellen und funktionellen Regulation beitragen.
• Calreticulin ist an der Regulation der maternalen Genexpression und der Calciumhomöostase während der Oozytenreifung beteiligt und könnte an der Blockade der Polyspermie nach der Befruchtung mitwirken.
• UniProt gibt sein Molekulargewicht mit 48.142 Da an; der Antikörper erkennt im Western Blot ein Band bei etwa 47 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 18–203 von humanem Calreticulin (NP_004334.1) umfasst und der N-terminalen Domäne entspricht; diese Region ist hochkonserviert zwischen Human, Maus und Ratte, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für den Western Blot (WB) wird eine spezifische Bande bei etwa 47 kDa erwartet; verwenden Sie geeignete Ladekontrollen und validieren Sie in Zell- oder Gewebelysaten, von denen bekannt ist, dass sie Calreticulin exprimieren.
• Die KO-Validierung bestätigt die Antikörperspezifität; ziehen Sie in Ihren Experimenten die Verwendung isogener Wildtyp- und Calreticulin-Knockout-Zelllinien als Negativkontrollen in Betracht.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffinschnitte, IHC-P) kann eine Antigen-Demaskierung erforderlich sein; optimieren Sie die Antikörperverdünnung und Nachweisbedingungen für Ihre spezifischen Proben.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz verwendet werden; kombinieren Sie ihn mit geeigneten passenden Antikörpern und validieren Sie ihn in der relevanten biologischen Matrix.

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