Anti-Calpain 1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P07384

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Calpain-1-Funktion und -Lokalisierung

• Calpain 1, codiert durch CAPN1, ist die katalytische Untereinheit des calciumaktivierten neutralen Proteases Calpain‑1, auch bekannt als mu‑Calpain (muCANP).
• Es fungiert als ein calciumreguliertes, nicht-lysosomales Thiol-Protease, das die limitierte Proteolyse von Substraten katalysiert, die am Zytoskelett-Umbau und der Signaltransduktion beteiligt sind. Verwandte Referenzen: PMID:19617626, PMID:21531719, PMID:2400579
• Calpain 1 spaltet und aktiviert Caspase‑7 (CASP7) und verknüpft somit seine proteolytische Aktivität mit apoptotischen Signalwegen. Verwandte Referenzen: PMID:19617626
• Es spaltet proteolytisch den transkriptionellen Co-Repressor CTBP1 an spezifischen Resten (Asn‑375, Gly‑387, His‑409), was Calpain‑1 in die transkriptionelle Regulation einbindet. Verwandte Referenzen: PMID:23707407
• Das Protein lokalisiert sich primär im Zytoplasma und kann nach Calciumaktivierung mit der Zellmembran assoziieren.
• Die CAPN1-Expression ist in menschlichen Geweben ubiquitär, was seine fundamentale zelluläre Rolle unterstreicht.
• Krankheitsassoziierte Varianten in CAPN1 verursachen hereditäre spastische Paraplegie (SPG76), was die Bedeutung des Proteins für die neuronale Aufrechterhaltung hervorhebt.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich autokatalytischer Spaltung, Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, regulieren die Aktivität und Stabilität von Calpain 1 engmaschig.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 100–200 von humanem Calpain 1 abdeckt; diese Region könnte bei Maus und Ratte konserviert sein, was die beobachtete Kreuzreaktivität erklären könnte.
• Für den Western Blot sollten reduzierende SDS‑PAGE-Bedingungen in Betracht gezogen werden, um die große Untereinheit von Calpain‑1 (~82 kDa) zu detektieren; validieren Sie mit geeigneten positiven Kontrollen.
• In IF/ICC-Experimenten ist möglicherweise eine Permeabilisierung erforderlich, um an intrazelluläres Calpain‑1 zu gelangen; optimieren Sie die Fixierung, um die Epitoperkennung zu erhalten.
• Für ELISA-Anwendungen beschichten Sie die Platten mit dem Immunogen-Peptid oder rekombinantem Protein und validieren Sie die Detektionsbedingungen im relevanten Probensystem.

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