Anti-CAD Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27708

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CAD

• CAD ist ein multifunktionales Protein, das die ersten drei enzymatischen Aktivitäten des de novo-Pyrimidinbiosynthesewegs durchführt: Carbamoylphosphatsynthetase (CPSase), Aspartattranscarbamylase (ATCase) und Dihydroorotase (DHOase).
• Die CPSase-Funktion läuft in zwei Schritten ab: Eine glutaminabhängige Amidotransferase (GATase)-Domäne erzeugt Ammoniak, das anschließend von der ammoniumabhängigen Carbamoylphosphatsynthetase-Domäne verwendet wird, um Carbamoylphosphat aus ATP und Hydrogencarbonat herzustellen.
• ATCase katalysiert die Bildung von Carbamoyl-L-aspartat aus L-Aspartat und Carbamoylphosphat.
• DHOase katalysiert die Zyklisierung von Carbamoylaspartat zu Dihydroorotat und schließt damit die Anfangsschritte der UMP-Synthese ab.
• CAD lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern.
• Es unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung und fungiert als zink- und metallabhängiges allosterisches Enzym.
• Mutationen in CAD sind mit der kongenitalen Glykosylierungsstörung Typ 1Z (CDG1Z) und der entwicklungsbedingten und epileptischen Enzephalopathie 50 (DEE50/EIEE50) verbunden.
• Alternative Bezeichnungen für CAD sind Carbamoylphosphatsynthetase 2-Aspartattranscarbamylase-Dihydroorotase.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht einer C-terminalen Region (AS 1650-1900) von humanem CAD; berücksichtigen Sie dies bei der Dateninterpretation in Studien zu Trunkierungen oder Isoformen.
• Bei Western Blotting ist mit einer Bande bei ca. 243 kDa zu rechnen; verwenden Sie einen passenden Gelprozentsatz und Transferbedingungen für Proteine mit hohem Molekulargewicht.
• Bei IHC-P und IF/ICC kann sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Färbung beobachtet werden; verwenden Sie passende Kontrollen und optimieren Sie Fixierung/Permeabilisierung.
• Validieren Sie den Antikörper für Ihre spezifische Probenart und Anwendung durch eine Verdünnungsreihe, da optimale Arbeitskonzentrationen variieren können.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist nachgewiesen; bestätigen Sie die Leistung in diesen Spezies, falls diese Teil Ihres Versuchssystems sind.

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