Anti-C9orf114 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q5T280

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von C9orf114

• C9orf114 (auch bekannt als CENP32, SPOUT1) ist eine 28S rRNA Uridin-N(3)-Methyltransferase, die die S-adenosyl-L-methionin-abhängige Methylierung von Uridin in der 28S rRNA katalysiert – eine Modifikation, die für die Ribosomenfunktion entscheidend ist. Verwandte Referenzen: PMID:39671501 PMID:39962046

• Es spielt eine wesentliche Rolle bei der Organisation der mitotischen Spindel, indem es die korrekte Assoziation von Zentrosomen mit den Polen der bipolaren Spindel während der Metaphase gewährleistet und dadurch zur genauen Chromosomenausrichtung beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:20813266 PMID:25657325 PMID:39962046

• Das Protein wirkt als kinetochorassoziierter Faktor und lokalisiert an Zentromere und Zentrosomen, wodurch es zentromerische und zentrosomale Funktionen während der Zellteilung verbindet.

• C9orf114 kann die Zentrosomenreifung fördern, indem es das A-Kinase-Ankerprotein AKAP9 in der frühen Mitose an Zentrosomen rekrutiert und die korrekte Spindelbildung erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:25657325

• Über seine mitotische Funktion hinaus bindet C9orf114 spezifisch an die MIR145-Haarnadel-Vorläufer und reguliert die MIR145-Expression posttranskriptionell, wodurch seine Funktion mit der MikroRNA-Prozessierung verknüpft ist. Verwandte Referenzen: PMID:28431233

• Das Protein ist ein Mitglied der SPOUT-Domäne enthaltenden Methyltransferase-Superfamilie und trägt eine charakteristische S-Adenosylmethionin-bindende Faltung.

• Mutationen im SPOUT1-Gen werden mit neurologischen Erkrankungen wie Epilepsie und geistiger Behinderung in Verbindung gebracht, was seine Bedeutung für die menschliche Entwicklung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die zentrale Region (AS 163–340) von humanem C9orf114 und erkennt wahrscheinlich mehrere Epitope; berücksichtigen Sie dies bei der Gestaltung von Experimenten, die eine genaue Domänenerkennung erfordern.
• Für den Western Blot laden Sie 20–40 µg Gesamtproteinlysat aus humanen oder Ratten-Zelllinien auf und untersuchen Sie es; das erwartete Molekulargewicht beträgt etwa 42 kDa. Bestätigen Sie die Bandspezifität durch den Vergleich mit einer Negativkontrolle oder durch siRNA-Knockdown.
• Führen Sie bei IHC-P eine Antigen-Retrieval durch und validieren Sie die Färbung in Gewebeschnitten, von denen bekannt ist, dass sie C9orf114 exprimieren (z. B. proliferative Gewebe mit aktiver Mitose). Beobachten Sie die zentromere und zentrosomale Lokalisierung in mitotischen Zellen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; optimieren Sie die Beschichtungskonzentration und Detektionsbedingungen empirisch.
• Als polyclonaler Antikörper beachten Sie bitte die potenzielle Chargenvariabilität und validieren Sie bei Verwendung einer neuen Charge erneut.

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