Anti-C3 Rabbit Polyclonal Antibody für WB, ELISA - P01027

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Komplement C3

• Komplement C3 ist ein zentrales Vorläuferprotein nicht-enzymatischer Komponenten in den klassischen, alternativen, Lektin- und GZMK-Komplementwegen, was zur Opsonisierung, Phagozytose und Immunsignalisierung führt.
• Nach Spaltung durch C3-Konvertase wird C3b erzeugt und kovalent über seine reaktive Thioesterbindung an Pathogenoberflächen gebunden, wirkt als Opsonin und bildet durch Rekrutierung von Komplement C2b oder CFB einen Teil der C5-Konvertase.
• Das Anaphylatoxin C3a, das durch Spaltung freigesetzt wird, bindet an den C3AR1-Rezeptor, um die Degranulation von Mastzellen und Basophilen zu stimulieren, Entzündungen zu fördern und als Chemotaktikum für Makrophagen und Neutrophile zu wirken.
• Ein adipogener Fragment von C3 (ASP/C3adesArg) stimuliert die Triglyceridsynthese und den Glucosetransport in Adipozyten über C5AR2 und reguliert die Fettspeicherung ohne proinflammatorische Aktivität.
• Bei chronischer Entzündung wirken C3-abgeleitete Peptide als Chemotaktika für Neutrophile und erleichtern die Wanderung in entzündetes Gewebe.
• Komplement C3 wird sezerniert und nach Aktivierung auch auf der Zelloberfläche gefunden; es unterzieht sich wichtigen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Spaltung an basischen Resten, Disulfidbrückenbildung und Thioesterbrückenbildung.
• Das Protein gehört zu einer Familie von Effektoren der angeborenen Immunität und verfügt über alternative Initiationsstellen, mehrere Phosphorylierungsstellen und Glykosylierungen, die zu seiner funktionalen Vielfalt beitragen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Peptid innerhalb der Aminosäuren 1159-1286 von Maus-C3, einem Bereich innerhalb der C3d-Domäne; dieses Design kann die Erkennung des nativen Proteins und seiner gespaltenen Fragmente begünstigen.
• Für Western Blots sollten die Verwendung reduzierender Bedingungen und geeigneter Molekulargewichtsmarker in Betracht gezogen werden, um das 186 kDa Vorläuferprotein oder die verarbeiteten Ketten zu detektieren. Validieren Sie die Spezifität unter Verwendung von relevantem Maus- oder Rattenserum oder Gewebelysaten, die C3 exprimieren.
• In ELISA-Anwendungen kann die polyklonale Natur dieses Antikörpers die Detektionsempfindlichkeit verbessern; jedoch sollte die Kreuzreaktivität mit anderen Komponenten des Komplementsystems experimentell überprüft werden.

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