Anti-C3-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P01024

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von C3

• Komplement C3 ist die zentrale Komponente des klassischen, alternativen, Lektin- und GZMK-Komplementwegs. Es ist der Vorläufer des Opsonins C3b, das kovalent an Pathogenoberflächen bindet, diese für die Phagozytose markiert und den C5-Konvertase-Komplex bildet, der das Komplementprotein C5 aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:28264884, PMID:31507604, PMID:3653927, PMID:6903192, PMID:12878586, PMID:18204047, PMID:2387864, PMID:624565, PMID:6554279
• Das durch die Spaltung durch die C3-Konvertase erzeugte C3a-Anaphylatoxin bindet an den C3AR1-Rezeptor und induziert die Degranulation von Mastzellen und Basophilen, die Chemotaxis von Makrophagen und Neutrophilen sowie die Freisetzung proinflammatorischer Zytokine. Verwandte Referenzen: PMID:6968751, PMID:37169960, PMID:37852260, PMID:8702752, PMID:23383423, PMID:342601, PMID:5778786
• C3 fungiert als adipogenes Hormon und stimuliert über den C5AR2-Rezeptor sowie die nachgeschalteten PLC-, MAPK- und AKT-Signalwege die Triglyceridsynthese und den Glukosetransport in Adipozyten. Verwandte Referenzen: PMID:10432298, PMID:15833747, PMID:16333141, PMID:11773063, PMID:12540846, PMID:19615750
• Es wirkt bei chronischen Entzündungen als Chemoattraktant für Neutrophile.
• C3 wird sezerniert und ist auch auf der Zelloberfläche zu finden, wobei seine reaktive Thioesterbindung die kovalente Bindung an Zieloberflächen ermöglicht.
• Das Plasma ist der primäre Ort von C3, aber C3 wird während des Fastens und in postprandialen Phasen auch von Adipozyten produziert und freigesetzt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung, Thioesterbindungsbildung und Phosphorylierung, die für seine Stabilität und Funktion entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht dem C3c-Fragment (Aminosäuren 1364-1663); der Antikörper kann vollständiges C3 und Spaltprodukte erkennen, die diese Region enthalten, wie beispielsweise C3b und C3c.
• Beim Western Blot (WB) wird unter reduzierenden Bedingungen eine Bande bei etwa 187 kDa erwartet; aufgrund der physiologischen Verarbeitung von C3 können zusätzliche Banden mit niedrigerem Molekulargewicht auftreten.
• Für Immunfluoreszenz/ICC sollten geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden. Verwenden Sie zur Beurteilung der spezifischen Färbung eine Positivkontrolle, beispielsweise serumbehandelte Zellen oder Gewebeschnitte.
• Bei ELISA-Anwendungen kann die Kombination mit anderen C3-Antikörpern oder Komplementmarkern die Empfindlichkeit erhöhen. Fügen Sie geeignete Negativkontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Validieren Sie den Antikörper in relevanten Probensystemen (z. B. Mensch, Maus, Ratte) und berücksichtigen Sie seine Leistungsfähigkeit in Assays zur Komplementaktivierung.

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