Anti-BUB3 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O43684

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BUB3-Funktion und -Lokalisation

• BUB3 (Mitotisches Checkpoint-Protein BUB3) ist ein ~37 kDa Protein, das vom BUB3-Gen kodiert wird, wobei mehrere Isoformen durch alternatives Spleißen entstehen.
• Es spielt eine Doppelrolle im Spindelassemblierungs-Checkpoint, sowohl bei der Signalgebung als auch bei der Förderung korrekter Kinetochor-Mikrotubulus (K-MT)-Verbindungen, um die Genauigkeit der Chromosomentrennung sicherzustellen.
• BUB3 bildet einen Komplex mit BUB1, um den Anaphase-fördernden Komplex/Cyclosom (APC/C) durch Phosphorylierung seines Aktivators CDC20 zu hemmen und so den Beginn der Anaphase zu verzögern, wenn der Checkpoint aktiv ist.
• Der BUB1/BUB3-Komplex phosphoryliert auch MAD1L1 und trägt so weiter zur mitotischen Arrestierung bei, bis alle Chromosomen eine korrekte bipolare Anhaftung erreichen.
• BUB3 ist für die Kinetochor-Lokalisierung von BUB1 essentiell und reguliert die Chromosomentrennung während der Oozytenmeiose.
• Subzellulär lokalisiert BUB3 im Zellkern und konzentriert sich während der Mitose an Zentromeren und Kinetochoren auf den Chromosomen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, ADP-Ribosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, was seine dynamische Regulation während des Zellzyklus widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 1-100) von humanem BUB3; der Antikörper erkennt wahrscheinlich das vollständige BUB3 und alle N-terminal konservierten Isoformen.
• Für Western Blot liegt das vorhergesagte Band bei ~37 kDa; aufgrund möglicher posttranslationaler Modifikationen können zusätzliche Banden beobachtet werden; validieren Sie die Spezifität unter Verwendung geeigneter Positiv- und Negativkontrollen.
• Bei IHC-P und IF/ICC optimieren Sie die Antigen-Demaskierung sowie Fixierungs-/Permeabilisierungsbedingungen für Ihren spezifischen Gewebe- oder Zelltyp; erwägen Sie die Verwendung bekannter Kinetochor-Marker als Co-Färbungen zur Bestätigung der Lokalisation.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise eine Titration sowohl der Capture- als auch der Detektionsreagenzien; es werden keine absoluten OD-Werte angegeben.

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